过表达RGL1通过激活CDC42/RAC1复合体上调运动型黏着斑组装促进结直肠癌转移

摘要

目的 探究Ral鸟嘌呤核苷酸解离激活样因子1(RGL1)在转移性结直肠癌中的作用及机制。方法 分析GEO数据库中RGL1在结直肠癌转移性和非转移性中的表达差异。收集珠江医院2020年1月～2022年12月50例临床转移性与非转移性结直肠癌患者，采用qPCR和免疫组化分析RGL1与结直肠癌转移的关系。体外构建稳定过表达和稳定干扰RGL1基因的细胞株，分别分组为：过表达对照组（veh）与过表达组（RGL1+），敲低对照组（shNC）与敲低组（shRGL1）。Western blotting实验验证过表达和干扰效率。Transwell实验体外验证细胞表型，明确RGL1对肿瘤细胞侵袭、迁移能力的影响。体内实验采用小鼠盲肠原位种植肝转移模型验证动物表型，明确RGL1对肿瘤转移的影响。细胞-基质黏附检测实验、免疫荧光实验验证RGL1与黏着斑形成的关系，免疫共沉淀实验探究RGL1与GTP酶活化的关系。结果 与非转移性结直肠癌相比，RGL1在转移性结直肠癌中高表达（P<0.05）。与对照组相比，过表达RGL1细胞中该基因上调（P<0.05），细胞迁移、侵袭能力增强（P<0.05），小鼠出现结直肠癌肝转移；并且加速了结直肠癌细胞运动型黏着斑的组装（P<0.05），促进了运动型黏着斑的形成，上调CDC42/RAC1的活化态与RGL1的结合。结论 RGL1在转移性结直肠癌中高表达，通过激活CDC42/RAC1复合体上调运动型黏着斑组装，从而促进结直肠癌转移。RGL1有望成为防治结直肠癌转移的新靶点。

关键词

RGL1 / 转移性结直肠癌 / 运动型黏着斑 / CDC42 / RAC1