WW结构域E3泛素连接酶1调控卵巢癌肿瘤微环境中的免疫浸润

摘要

目的 探讨WW结构域E3泛素连接酶1（WWP1）表达与卵巢癌肿瘤微环境（TME）免疫浸润调控的关系。方法 从TCGA获取卵巢癌患者数据，以中位值为截断值分为WWP1高表达和低表达组。生物信息学方法分析WWP1表达与卵巢癌预后关系；TISCH2比较WWP1在卵巢癌转移和化疗后TME不同免疫细胞亚型的差异；TIMER分析WWP1表达对TME免疫细胞浸润和体细胞拷贝数变异的影响；TIGER分析WWP1表达与卵巢癌不同免疫细胞亚型演化的关系；深度学习模型分析TCGA病理染色图像，确定WWP1对卵巢癌患者TME的影响；WWP1高表达前后的SKOV3细胞进行转录组测序，比较差异基因并进行免疫浸润验证分析；在SKOV3和SKOV3/DDP裸鼠肿瘤组织中采用多色免疫荧光比较分析免疫标志物差异。结果WWP1高表达卵巢癌患者的整体生存率低于WWP1低表达患者（P=0.0012）。高表达WWP1、Stage IV等与卵巢癌不良预后相关（P<0.05）。卵巢癌转移或化疗后，TME中恶性肿瘤细胞、肿瘤相关成纤维细胞比例明显升高，WWP1表达比例亦明显增高（P<0.05）。WWP1表达与TME中促肿瘤免疫抑制性细胞正相关（r=0.1323～0.3955,P<0.05），与抑制肿瘤的免疫浸润细胞负相关（r=-0.1949～-0.1333,P<0.05）。CD8+T细胞浸润水平与WWP1的深度缺失和染色体水平缺失有关，中性粒细胞浸润水平与WWP1高度扩增有关（P<0.05）。随着WWP1表达升高，TME中CD8⁺、NK T细胞比例逐渐减少，髓样细胞和B细胞逐渐演化为不同细胞亚型。TCGA患者病理标本HE染色、高表达WWP1的SKOV3细胞转录组测序和裸鼠肿瘤组织多色免疫荧光分析确认了与生信分析相似的TME免疫细胞浸润结果。结论 WWP1可能是卵巢癌的一个预后预测因子和潜在的TME免疫调控靶点。

关键词

卵巢癌 / WW结构域E3泛素连接酶1 / 免疫浸润 / 肿瘤微环境