调周滋阴方治疗早发性卵巢功能不全的疗效、安全性及作用机制

摘要

目的 基于网络药理学探讨调周滋阴方治疗早发性卵巢功能不全（POI）的作用机制，通过动物实验进行验证，并设计临床对照试验验证调周滋阴方对该病的临床疗效。方法 利用TCMSP、PubChem、Swiss Target Prediction、Genecards、OMIM等数据库筛选相应靶点，获取核心PPI，进行GO、KEGG富集分析，构建“疾病-通路-靶点-成分-药物”网络，采用AutoDock对核心活性成分和核心靶点进行分子对接验证。通过动物实验，采用Western blotting进一步验证网络药理学结果。设计临床对照试验，对照组予芬吗通治疗，试验组在此基础上加用调周滋阴方，通过观察两组内分泌指标（FSH、LH、E2、AMH）、窦卵泡数、Kupperman评分、不良反应发生率及妊娠率，验证调周滋阴方治疗该病的临床有效性。结果 通过网络药理学方法，得到调周滋阴方治疗早发性卵巢功能不全的潜在靶点有163个；核心活性成分主要为山奈酚、β-谷甾醇、木犀草素、槲皮素，核心靶点主要为SRC、TP53、STAT3、PIK3CA、MAPK3等；GO功能富集主要包括细胞运动的正调控、蛋白质磷酸化等；KEGG富集通路主要包括癌症通路、PI3K-Akt信号通路等；分子对接结果显示核心活性成分与核心靶点间均有良好的结合能力。利用动物实验对关键通路进行验证，结果显示，与POI模型组大鼠比较，调周滋阴方可升高POI大鼠卵巢组织中p-PI3K和p-Akt蛋白表达（P<0.05），验证了网络药理学的部分预测结果。临床试验显示，两组E2较治疗前升高，FSH、LH较治疗前降低，Kupperman评分较治疗前降低（P<0.05），且试验组优于对照组（P<0.05）；两组窦卵泡数较治疗前均升高（P<0.05），试验组AMH较治疗前升高（P<0.05），试验组与对照组间的差异无统计学意义（P>0.05）；治疗结束4周后，试验组治疗效果优于同期对照组（P<0.05）。结论 调周滋阴方具有多成分、多靶点、多途径的治疗特点，其中激活PI3K/Akt通路是其作用机制之一，从而改善POI患者卵巢储备功能，缓解临床症状，提高临床疗效，具有良好的临床应用前景。

关键词

早发性卵巢功能不全 / 调周滋阴方 / 网络药理学 / 实验验证 / 临床观察