电针通过调控海马谷氨酸释放抑制HPA轴亢进从而改善急性心肌缺血大鼠的心肌损伤

摘要

目的 验证海马谷氨酸（Glu）能系统介导调控下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA）在电针心经改善急性心肌缺血（AMI）大鼠心肌损伤中的作用。方法 雄性SD大鼠随机分成4组，分别为假手术组（Sham）、模型组（Model）、针刺组（EA）及L-谷氨酸+针刺组（Glu+EA）,9只/组。采用左冠状动脉前降支结扎法制备AMI模型，并选择“神门-通里”段进行电针治疗。其中Glu+EA组在海马双侧注射L-谷氨酸的基础上复制AMI模型后予以电针治疗。采用心动超声左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短指数（LVFS）评估心功能，PowerLab记录心电图，LabChart分析心率变异性（HRV）中频域指标低频功率（LF）和高频功率（HF）及LF/HF比值变化，HE染色法检测心肌组织病理学变化，ELISA法检测血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌肌钙蛋白（cTnT）、促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、皮质醇（CORT）、去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）及海马Glu含量，免疫组化染色观察心肌酪氨酸羟化酶（TH）、生长相关蛋白-43(GAP 43)的阳性表达，免疫荧光染色观察海马囊泡谷氨酸转运蛋白1(VGLUT1)、囊泡谷氨酸转运蛋白2(VGLUT2)和原癌基因蛋白（c-fos）共定位，Western Blotting检测海马VGLUT1、VGLUT2、N-甲基-D-天门冬氨酸受体1(NMDAR1)、N-甲基-D-天冬氨酸受体2B(NMDAR2B)蛋白表达。结果 与Sham组比较，Model组大鼠LVEF、LVFS降低（P<0.01），心肌酶CK-MB、cTnT含量增加（P<0.01）,HE染色观察到心肌组织明显的细胞水肿、心肌纤维排列紊乱及炎性细胞广泛浸润，HPA轴激素CRH、CORT含量明显增加（P<0.01），且与心肌酶呈正相关，与LVEF、LVFS呈负相关（P<0.01）,HRV中HF比值降低，LF比值与LF/HF升高（P<0.01），交感神经活性标记物TH、GAP 43的阳性神经纤维分布增加，儿茶酚胺递质NE、E表达升高（P<0.01），海马VGLUT1、VGLUT2与c-fos共定位的阳性细胞数量增加（P<0.01）,VGLUT1、VGLUT2、NMDAR1、NMDAR2B蛋白及Glu递质水平升高（P<0.01）；与Model组和Glu+EA组比较，EA组大鼠LVEF、LVFS均升高（P<0.01,P<0.05），心肌酶水平降低（P<0.05,P<0.01），心肌组织病理损伤程度减轻，HF比值升高，LF比值与LF/HF降低（P<0.01），交感神经活性标记物的阳性神经纤维分布降低，儿茶酚胺类递质及HPA轴激素表达均减少（P<0.01），海马VGLUT1、VGLUT2与c-fos共定位的阳性细胞数量减少（P<0.01）,Glu递质及受体表达明显降低（P<0.01,P<0.05）。结论 电针心经可能通过调控海马谷氨酸释放，抑制HPA轴过度亢进，从而调节交感神经活性，达到保护心肌的作用。

关键词

心肌缺血 / 电针 / 海马 / HPA轴 / 谷氨酸