肝豆扶木汤通过GPX4/ACSL4/ALOX15通路抑制铁死亡改善Wilson病小鼠的肝脏脂肪变性

摘要

目的 基于GPX4/ACSL4/ALOX15信号通路探讨肝豆扶木汤（GDFMD）对tx-J小鼠抑制铁死亡改善肝脏脂肪变性作用的机制。方法 以6只同系野生型WT小鼠作为对照组，30只tx-J小鼠随机分为模型组、GDFMD低、中、高剂量组、Fer-1组。对照组及模型组予以等量生理盐水，GDFMD低中高剂量分别予以3.48 g/kg、6.96 g/kg、13.92 g/kg灌胃，Fer-1组1 mg/（kg·d），腹腔注射，1次/d，持续14 d；油红、HE染色观察肝脏组织脂质沉积与病理情况；采用谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、白蛋白（ALB）、碱性磷酸酶（AKP）试剂盒观察肝功能指标；WB及PCR测量小鼠内GPX4、ACSL4、ALOX15、FTH1、FLT、TFR1、FAS、SCD1、ACOX1蛋白及mRNA的表达；测定肝脏组织内Fe²⁺、Cu²⁺的含量；丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）、4-羟基壬烯醛（4-HNE）试剂盒测定氧化应激指标。结果 与对照组相比，模型组小鼠的肝脏组织出现明显的脂肪变性；血清ALT、AST、AKP水平显著升高（P<0.01）,ALB水平下降（P<0.05）;Fe²⁺、Cu²⁺、MDA、4-HNE、ROS的水平增高（P<0.05）,SOD和GSH的水平降低（P<0.05）;ACOX1、GPX4、FTH1、FLT、FAS、SCD1蛋白含量下降，TFR1、ACSL4、ALOX15蛋白含量上升；与模型组相比，GDFMD及Fer-1组肝脏组织病理出现不同程度的好转；血清ALT、AST水平降低；Fe²⁺、Cu²⁺、MDA、4-HNE、ROS的水平降低，SOD和GSH的水平升高；ACOX1、GPX4、FTH1、FLT、FAS、SCD1、蛋白含量上升，TFR1、ACSL4、ALOX15蛋白含量下降。结论 GDFMD可能通过GPX4/ACSL4/ALOX15信号通路抑制铁死亡改善wilson病小鼠的肝脏脂肪变性。

关键词

wilson病 / 肝豆状核变性 / 铁死亡 / 肝脏的脂肪变性