天麻钩藤饮通过抑制坏死性凋亡通路改善帕金森病小鼠的运动功能障碍

摘要

目的 利用网络药理学分析、分子对接分析及动物实验验证探讨天麻钩藤饮（TGY）对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）诱导的亚急性帕金森病（PD）模型小鼠的运动功能障碍及分子机制的影响。方法 90只8周龄C57BL/6小鼠随机分为6组（n=15）：对照组、模型组、模型+坏死性凋亡抑制剂NEC-1组（6.5 mg/kg）、模型+不同剂量的天麻钩藤饮治疗（TGY-L组2.5 g/kg;TGY-H组5 g/kg）、模型+阳性对照美多芭组（76 mg/kg）。采用连续5 d腹腔注射MPTP (30 mg/kg)构建亚急性PD小鼠模型。随机选取小鼠进行运动能力测试（n=6）;Western blotting检测小鼠纹状体中酪氨酸羟化酶（TH）和α-突触核蛋白（α-syn）、坏死性凋亡相关蛋白受体相互作用蛋白1(RIPK1)、RIPK3和混合谱系激酶域样（MLKL）及磷酸化的表达情况（n=4），并基于网络药理学和分子对接分析方法对天麻钩藤饮调控坏死性凋亡治疗PD的关键靶点进行预测。结果 与对照组相比，PD组小鼠出现运动功能障碍，α-syn表达增加（P<0.001）,TH蛋白表达下降（P<0.001）。连续6 d的NEC-1治疗后运动功能得到改善，p-RIPK1/RIPK1、p-RIPK3/RIPK3、p-MLKL/MLKL和α-syn表达减少（P<0.05或P<0.001），以及TH表达增加（P<0.01）。网络药理学预测结果显示天麻钩藤饮可调控坏死性凋亡通路中的RIPK1来改善神经退行性疾病，且分子对接结果表明天麻钩藤饮中的化合物与RIPK1存在相互作用。动物实验结果证实，低、高剂量的天麻钩藤饮改善了PD小鼠的运动功能障碍，增加TH表达（P<0.01），降低α-syn和坏死性凋亡通路相关蛋白表达水平（P<0.05或P<0.01）。结论 天麻钩藤饮通过抑制坏死性凋亡通路，促进TH蛋白表达和减轻α-syn蓄积，进而改善PD小鼠的运动功能障碍。

关键词

帕金森病 / 天麻钩藤饮 / 运动功能障碍 / 坏死性凋亡