金樱子通过调控Src-AKT1轴抑制肺动脉高压平滑肌增殖

摘要

目的 探讨传统中药金樱子（RLM）治疗肺动脉高压（PAH）的协同机制，通过网络药理学预测其活性成分与作用靶点，并通过体内外实验验证其抗增殖效应降低细胞内钙离子浓度作用。方法 网络药理学分析：筛选金樱子活性成分及PAH疾病靶点，构建“成分-靶点-疾病”互作网络，进行基因富集分析与分子对接验证。体外实验：设置对照组、缺氧组+溶剂对照、缺氧+金樱子（100 mg/mL）、缺氧+金樱子（200 mg/mL）、缺氧+金樱子（300 mg/mL），通过Western blotting和免疫荧光检测细胞增殖。动物实验：将大鼠随机分为5组：阴性对照组、野百合碱（MCT）+溶剂对照、野百合碱+金樱子（100 mg/mL）,MCT+金樱子（200 mg/mL）、MCT+金樱子（300 mg/mL）。HE染色、免疫荧光染色观察肺血管形态学变化。结果 网络分析筛选出7种核心活性成分（如β-谷甾醇、山奈酚）及39个关键靶点，分子对接显示Src为高亲和力靶点。KEGG富集分析显示，差异基因显著富集于钙信号通路和PI3K-AKT通路。体外实验表明，与对照组相比，Hypo组PCNA上调（P<0.001）。金樱子显著抑制PASMCs增殖（PCNA表达下调）。Western blotting实验证实金樱子可以抑制Src和AKT1的磷酸化。动物实验证实，金樱子治疗组肺动脉平均压（P<0.001）和右心室肥厚指数降低，右心室射血功能改善，肺血管壁增厚和纤维化减轻。结论 金樱子通过调控Src-AKT1轴，发挥抗平滑肌增殖的作用，为肺动脉高压的治疗提供了新型天然药物候选策略。

关键词

肺动脉高压 / 平滑肌细胞增殖 / AKT1 / Src / 网络药理学