热应激对大鼠胸主动脉内皮细胞生物钟基因Bmal1和细胞周期蛋白表达水平的影响（英文）

摘要

目的 研究热应激条件下大鼠胸主动脉结构的变化以及胸主动脉内皮细胞Bmal1和周期蛋白表达水平的变化。方法选取20只雄性SD大鼠，随机分为对照组和热应激组（各10只），用HE染色法观察胸主动脉的组织病理学变化，免疫组化法检测胸主动脉中Bmal1的表达。体外实验采用大鼠胸主动脉内皮细胞（RTAECs），分为对照组、阴性对照组、阴性热暴露组、热暴露组（HS）、Bmal1干扰（si-Bmal1）组和si-Bmal1+HS组。体内和体外实验均采用Western blotting检测Bmal1、细胞周期蛋白CDK1、CDK4、CDK6和cyclin B1以及凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。TUNEL法检测胸主动脉中的细胞凋亡，流式细胞术检测RTAECs的细胞周期分布和凋亡水平变化。结果 与对照组相比，热应激组大鼠血压升高，心率减慢，胸主动脉出现弹力纤维断裂，Bmal1、cyclin B1和CDK1表达增加。体外结果显示，与对照组相比，热应激组RTAECs中Bmal1、cyclin B1和CDK1蛋白表达水平升高；si-Bmal1转染逆转了热应激引起的细胞周期蛋白表达改变并抑制热应激诱导的细胞凋亡，表现为Bax表达降低和Bcl-2表达升高（P<0.05）。结论 热应激上调大鼠胸主动脉内皮细胞中生物钟基因Bmal1和细胞周期蛋白的表达，最终引发细胞凋亡。抑制Bmal1的表达可逆转热应激诱导的大鼠胸主动脉上皮细胞损伤，并在一定程度上缓解热应激引起的细胞周期变化。

关键词

热应激 / 生物钟基因 / Bmal1 / 胸主动脉内皮细胞 / 周期蛋白 / 细胞凋亡