卡那霉素抗性根瘤菌工程菌株的构建

姜科迪; 代理强; 泮佳琦; 石函琪; 皮二旭; 汪尚

doi:10.19926/j.cnki.issn.1674-232X.2025.12.261

杭州师范大学学报（自然科学版） ›› 2026, Vol. 25 ›› Issue (5) : 503 -508+524. DOI: 10.19926/j.cnki.issn.1674-232X.2025.12.261

卡那霉素抗性根瘤菌工程菌株的构建

姜科迪, 代理强, 泮佳琦, 石函琪, 皮二旭, 汪尚

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摘要

以含有质粒pUTKM1（携带mob基因）的大肠杆菌（Escherichia coli）S17-1λpir为供体菌、费氏中华根瘤菌（Sinorhizobium fredii）15106为受体菌、含质粒pRK600（携带tra基因）的E.coli为辅助菌，采用三亲本杂交试验，将质粒pUTKM1中携带卡那霉素抗性基因Kan^R的Tn5转座子随机整合至S.fredii 15106株系的基因组中，构建了一种具卡那霉素抗性的根瘤菌工程菌株.PCR结果证实，改造后的工程菌株扩增出Kan^R基因条带.共生试验结果显示：接种S.fredii卡那霉素抗性工程菌株的大豆植株可正常结瘤，与未接种植株相比，其株高、鲜质量分别提升38.91%、27.47%（P<0.001）,而与接种野生型S.fredii 15106的大豆植株相比，株高、鲜质量、结瘤数无显著差异（P>0.05）.上述结果表明，该工程菌株携带Kan^R且共生功能稳定，为豆科植物共生固氮机制研究、高效根瘤菌肥的开发与规模化应用提供了可精准追踪、稳定可控的菌种材料.