牦牛小肠上皮细胞分离培养及鉴定

王菲; 战立聪; 吴庆侠; 董海龙; 朱洪云

doi:10.19707/j.cnki.jpa.2018.02.008

高原农业 ›› 2018, Vol. 2 ›› Issue (02) : 152 -157. DOI: 10.19707/j.cnki.jpa.2018.02.008

牦牛小肠上皮细胞分离培养及鉴定

王菲, 战立聪, 吴庆侠, 董海龙, 朱洪云

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摘要

为体外研究牦牛肠道粘膜免疫及肠道微生物与肠粘膜之间的互作关系提供细胞,本试验采用组织块培养法培养牦牛小肠上皮细胞(intestinal epithelial cell,IEC),差异消化法进行纯化,免疫细胞化学法进行鉴定,并用细胞计数法测定其生长曲线。组织块培养法结合差异消化法可分离纯化出牦牛小肠上皮细胞,免疫细胞化学法检测显示该细胞波形蛋白染色为阴性,角蛋白染色为阳性,阳性率达到90%;细胞生长曲线显示细胞接种1d后开始贴壁生长,3-6d进入对数生长期,从第7d开始细胞增殖基本处于停滞期。采用组织块培养法成功获得了牦牛小肠上皮细胞,证明该方法可为研究牦牛肠道免疫和肠道微生物与肠粘膜之间的互作提供牦牛小肠上皮细胞。