西藏绵羊颗粒细胞的体外培养

田孟芳; 卢晓丽; 程志鹏; 任子利; 孙磊; 赵彦玲

doi:10.19707/j.cnki.jpa.2019.05.007

高原农业 ›› 2019, Vol. 3 ›› Issue (05) : 510 -514. DOI: 10.19707/j.cnki.jpa.2019.05.007

西藏绵羊颗粒细胞的体外培养

田孟芳, 卢晓丽, 程志鹏, 任子利, 孙磊, 赵彦玲

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摘要

对绵羊颗粒细胞进行体外培养、冷冻复苏。采集西藏绵羊卵巢,用注射器抽吸卵泡中的卵泡液,经低速离心分离沉淀得到卵泡内的颗粒细胞,用于体外培养。结果显示:原代培养时,颗粒细胞形成单层需要6～7d,形状多为梭形或不规则三角形,呈放射状;传代颗粒细胞生长速度较快,接种后第二天细胞就开始贴壁,第6d左右长满平皿底,形成颗粒细胞单层,多呈流线型。当传至第3代培养后,即可获得纯化的颗粒细胞;冻存的细胞经复苏后仍保持其正常的结构和功能。细胞生长曲线呈"S"形,符合贴壁细胞的生长特征。可见,所建立的西藏绵羊颗粒细胞分离方法和保存方法可行有效,这能为西藏绵羊的体细胞克隆提供供体细胞,也能为建立西藏绵羊遗传资源体细胞库等研究奠定基础。