喜马拉雅紫茉莉不同组织总RNA提取方法的比较分析

袁芳; 王靖; 王昭凤; 兰小中

doi:10.19707/j.cnki.jpa.2021.05.008

高原农业 ›› 2021, Vol. 5 ›› Issue (05) : 485 -489+523. DOI: 10.19707/j.cnki.jpa.2021.05.008

喜马拉雅紫茉莉不同组织总RNA提取方法的比较分析

袁芳, 王靖, 王昭凤, 兰小中

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摘要

为了从喜马拉雅紫茉莉不同组织中提取高质量的总RNA,本研究以喜马拉雅紫茉莉的根、茎和叶组织为材料,采用Trizol法、改良Trizol法、CTAB-LiCl法和试剂盒法提取总RNA,使用琼脂糖凝胶电泳和超微量紫外分光光度计检测RNA的完整性、纯度与浓度。结果表明:Trizol法可用于叶组织RNA的提取,但RNA纯度低;改良Trizol法可用于茎和叶组织RNA的提取,RNA完整性较好,有少量的蛋白质、酚类物质和有机溶剂残留,茎和叶组织RNA的浓度分别为385.43 ng/μL、394.54 ng/μL;CTAB-LiCl法提取的根、茎和叶组织总RNA的浓度较低,并且RNA纯度差,A260/A280比值均大于2.0,A260/A230比值均小于2.0,RNA发生严重降解;试剂盒法提取的根、茎和叶组织总RNA完整性好,浓度高分别为:451.92 ng/μL、579.35 ng(14)μL和664.97 ng/μL,并且RNA纯度高,A260/A280比值均在1.8～2.0,A260/A230比值均大于2.0。因此,Trizol法和CTAB-LiCl法不适用于提取喜马拉雅紫茉莉总RNA,而改良Trizol法和试剂盒法可提取到质量较好的喜马拉雅紫茉莉总RNA。