河曲丝叶蜂对寄主白柳部分挥发物的触角电位和行为反应

Electroantennogram and behavioral responses of Nematus hequensis to a part of host volatiles about Salix alba

摘要

根据河曲丝叶蜂（Nematus hequensis ）对不同寄主挥发物的触角电位和行为反应，以期筛选出对该害虫成虫具有较强引诱作用的白柳植物挥发物和其最佳浓度，为该害虫的无害防治提供理论依据。在河曲丝叶蜂成虫羽化高峰期，使用固相微萃取和气相色谱质谱联用仪（GC-MS）鉴定白柳（Salix alba L.）挥发物成分；以正己烷为对照，利用触角电位仪 （ electroantennogram，EAG） 测定河曲丝叶蜂1日龄未交配雌雄成虫对5种寄主植物挥发物的EAG反应，使用 Y 型嗅觉仪测试其对5种寄主挥发物不同浓度的行为反应。EAG反应结果表明：河曲丝叶蜂雌、雄成虫对于5种化合物均有较明显的电生理反应，雄虫在叶醇为1 000 ng·μL ^-1 和 10 000 ng·μL ^-1 时引起较显著的EAG反应，并与其余4种化合物之间差异明显；雌虫在叶醇、丁香酚为1 000 ng·μL ^-1 时引起较明显的EAG反应，并与其余3种化合物之间差异明显。Y型嗅觉仪生测结果表明：只有丁香酚在1 000 ng·μL ^-1、10 000 ng·μL ^-1时对河曲丝叶蜂雌、雄成虫的引诱率与对照相比差异性显著（P<0.05）或极显著（P<0.01）。白柳挥发物中的丁香酚对河曲丝叶蜂未交配雌雄成虫有较好的引诱活性，说明其在河曲丝叶蜂识别寄主过程中有重要作用，可以用于开发该害虫的植物源引诱剂。

Abstract

Based on the electroantennogram(EAG)and behavioral responses of Nematus hequensis to different host volatiles, The aim was to screen out the Salix alba volatiles with strong attractiveness on the adult of this pest and the optimal concentration, so as to provide a theoretical basis for the harmless control of this pest. the volatiles of S. alba were identified by solid-phase microextraction (SPME) and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) at the peak of adult plumage. N-hexane was used as the control, the 1 day-old unmated females and males were determined by EAG to the five volatiles of S. alba; and the 1 day-old unmated females and males were determined by Y-tube olfactometer to different concentration gradients volatiles of five host plants. The results showed that unmated adult females and males of the N.hequensis showed obvious electrophysiological responses to the five compounds. Male adults showed significant EAG responses at 1 000 ng · μL^-1 and 10 000 ng · μL^-1 of leaf alcohol, which were significantly different from the other four compounds.When the concentration of leaf alcohol and eugenol was 1 000 ng · μL ^{- 1}, the female caused obvious EAG response, which was significantly different from the other three compounds.The results of the Y-tube olfactometer bioassay showed that only eugenol at 1 000 ng·μL^-1 and 10 000 ng·μL^-1 had significant or extremely significant differences in the attraction rate of male and female adults of N.hequensis compared with the control.The eugenol in the volatiles of S.alba had good attractive activity to the unmated male and female adults of N.hequensis, indicating that it played an important role in the host identification process of N.hequensis and could be used to develop plant-derived attractants for the pest.

Graphical abstract

关键词

河曲丝叶蜂 / 寄主挥发物 / 触角电位 / 行为反应

Key words

Nematus hequensis / Host volatiles / EAG / Behavioral response

河曲丝叶蜂 (Nematus hequensis ) ，属膜翅目 ( Hymenoptera ) ，叶蜂科（Tenthredinidae），突瓣叶蜂亚科（Nematinae），突瓣叶蜂属（Nematus），主要危害为旱柳（Salix matsudana ）、金丝柳（S. alba 'Tristis'）、也可以取食乌柳（S. cheilophila ）、簸箕柳（S. suchowensis）、加杨( Populus × canadensis )、白柳（S. alba）、北京杨（P.×beijingensis）^[1]，以幼虫取食树叶造成危害，具有虫口密度高、食量大、危害重、暴食性的特点。该虫分布在我国黑龙江、吉林（海龙）、辽宁（章古台）、内蒙古（呼伦贝尔）、北京、山西（酒家口）、甘肃（庆阳）、陕西(定边) 、江苏(镇江) 、浙江（天目山）、西藏（拉萨）等地,^[2-3]。目前该虫的防治主要以化学防治为主，虽然未见关于河曲丝叶蜂抗药性的相关报道，但是长期大量使用农药必然会导致河曲丝叶蜂抗药性的问题^[4]，探索绿色可持续防治技术符合社会需求。

植物与植食性昆虫在长期协同进化的过程中，形成了错综复杂的互作关系，植物挥发物就是二者之间的桥梁之一，同时作为重要因子参与了植物、植食性害虫和第三营养级生物关系的建立^[5-7]。寄主植物所释放的挥发物对植食性昆虫进行定位、选择、取食、产卵以及自身的其他活动，一般具有正趋性^[8,9]；而非寄主植物所释放的挥发物则会使植食性昆虫出现趋避等行为，一般具有负趋性^[10]。已有研究表明 3－辛酮、1－辛烯－3－醇、(Z) －3－己烯－1－醇、3－辛醇、茉莉酸甲酯和 N，N－二甲基乙酰胺植物挥发物对斑鞘豆叶甲（Colposcelis signata）均有明显的引诱作用^[11]。乳酸乙酯和2,2,4,6,6-五甲基庚烷对白星花金龟（Potosia brevitarsis）雌、雄两性成虫具有良好的引诱作用^[12]。 100 ng 的反-3-己烯醇和顺-3-己烯醇对东方绢金龟（Maladera orientalis）雌成虫具有显著的引诱作用^[13]。柠檬烯、α-蒎烯、β-石竹烯、异丁醛、芳樟醇、苯乙酸甲酯和苯乙醛对初羽化的柑橘大实蝇（Bactrocera minax）成虫具有显著或极显著的引诱作用，而柑橘大实蝇成虫对乙酸芳樟酯、水杨酸甲酯、戊醛和乙偶姻有明显的驱避作用，差异达到显著或极显著^[14]。利用寄主植物挥发物对昆虫的负趋性或正趋性，可以研发出植物源趋避剂或引诱剂，应用于害虫的无公害防治。

本研究在河曲丝叶蜂成虫羽化高峰期，采用固相微萃取和气相色谱质谱联用仪（GC-MS）对河曲丝叶蜂在拉萨主要产卵寄主白柳叶片的挥发物进行了鉴定，根据鉴定结果选取了5种白柳挥发物，采用EAG测定了1日龄河曲丝叶蜂未交配成虫对这5种挥发物不同浓度的触角电位反应，并通过Y型嗅觉仪生测了该成虫对这5种挥发物的行为反应，为河曲丝叶蜂植物源行为调节剂的研发提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 供试昆虫

2023年7月于西藏自治区农牧科学院（29°38′26″ N，91°2′5″ E）采集河曲丝叶蜂虫蛹带回实验室放入智能人工气候培养箱（PQX-300型，金坛市盛蓝仪器制造有限公司），温度17 ℃ ~ 26 ℃，RH为45% ~ 55%，光照周期：L:D=14 h:10 h。参考李广伟等的方法^[15]，待其羽化后将雌、雄成虫分别隔离饲养至1日龄（羽化后1个光周期视为1日龄）待用。

1.2 仪器设备

触角电位仪：型号为IDAC-2，德国Syntech公司生产的高精度仪器。信号采集系统：分辨率可达到0.1 μv的多通道USB接口数据采集控制器；取样速率达到 1-50 000·s ^-1；测量探头：导电胶电极连接昆虫触角；气流控制单元：刺激气流控制单元，带内置气泵，流量25 mL/s。所用软件为Syntech公司提供的配套专用软件。

Y形嗅觉仪：定制两侧臂等长，为15 cm，主臂长为17 cm，内直径均为3.5 cm，两侧臂夹角为60º的Y形玻璃管。参考唐晓琴等人的方法，将Y型管、样品瓶、风速流量计（LZB-3WB）、蒸馏水加湿瓶、活性炭过滤装置和空气抽气泵（QC-2B）用硅胶管依次连接起来^[16]，气流总流量控制在200 mL·min^-1左右。

1.3 供试化合物的选择

根据GC-MS鉴定结果，以正己烷为对照，选取河曲丝叶蜂寄主白柳的挥发物相对含量大于1%中的5种化合物进行触角电位和行为反应实验（见表1）。

1.4 方法

1.4.1 寄主植物挥发物的GC-MS分析

采用固相微萃取(SPME)和气象色谱质谱联用仪（GC-MS）分析。固相微萃取：萃取针的型号DVB/CAR/PDMS，老化温度250 ℃，时间为0.5 h，萃取温度35 ℃，萃取时间40 min，热解析温度250 ℃，热解析时间30 s，每次取5片完整白柳叶片进行吸附，3个重复。待完成后即刻进行GC-MS分析。GC-MS色谱柱：Agilent 19091J-416，其长度为30 m，内径为0.25 mm，膜厚为0.25 mm。GC方法：进样口的温度为260 ℃，初始温度从50 ℃开始，经过3 min的保持后，每分钟升温10 ℃，直到达到280 ℃，然后保持10 min，在这个过程中使用纯度为99.999%的He作为载气，同时保持柱流量为1 ml/min。MS方法：EI离子源下，质谱条件设定为电子能量为70 eV，离子源温度维持在230 ℃，接口温度为260 ℃。依据标准质谱库NIST（https://webbook.nist.gov/）和正构烷烃质谱图进行鉴定。确认无误后根据峰面积归一法进行定量分析，进而计算出每种组分在总挥发物中所占的百分比（%）=（每种单一组分的峰面积/所有挥发物的总面积）×100%。

1.4.2 河曲丝叶蜂对寄主挥发物的触角电位（EAG）反应

首先进行预实验，将1.3中的标准化合物用正己烷（≥99.5 %，上海阿拉丁生化科技股份有限公司）作为溶剂稀释，最终确定4个浓度梯度，分别为10 ng·μL^-1、100 ng·μL^-1、1 000 ng·μL、10 000 ng·μL^-1，用于测定1日龄河曲丝叶蜂未交配雌、雄成虫对于其寄主植物挥发物的触角电位反应。参考Aihua Wu等人的方法^[17]，使用眼科剪刀将河曲丝叶蜂沿触角基部剪下，随后迅速使用手术刀片将触角两端各切除0.5 ~ 1 mm，然后用导电胶（SPECTRA 360，USA）将触角固定在电极上，并将电极插入EAG的探头中，然后对仪器进行调试，待基线稳定即可开始进行测定。在测定过程中，使用移液器从不同浓度的挥发物中各取出 1 μL，滴在 25 × 7.5 mm 的干净滤纸片上，然后在室温下静置20 s，待正己烷完全挥发后，将其放入巴斯德管内（管口直径2 mm，长12 cm）；滴加同等体积的正己烷在大小一致的滤纸条上，条件同上作为对照组。每一种挥发物测试10根有活性触角（每头虫取1根触角），每个浓度进行3次平行测定，两次刺激之间间隔30 s，且每种挥发物测定前后各进行一次对照测定；同一挥发物按照从低到高的浓度顺序进行测定。

1.4.3 河曲丝叶蜂对寄主挥发物的行为反应

参考唐晓琴等人的方法^[16]，生测时，用移液枪取1 μL味源试剂滴在洁净的滤纸片上(30 × 40 mm)，待正己烷挥发20 s之后，再将其放入一个侧臂中，在另一侧臂上放入滴有正己烷的滤纸片做对照。随后，打开空气泵，调节玻璃转子流量计，使气流保持在200 mL·min^-1，然后在Y型管主臂开口端1/3处，分别单头引入1日龄河曲丝叶蜂未交配雌、雄成虫一只，观察10 min。当试虫到达某一侧壁的1/2处，并在该侧臂停留1 min以上，则记录该试虫已经做出选择。若该虫选择对照臂则记为“趋避”，若选择味源臂则记为“诱引”；如试虫在引入后8 min内无任何行为反应，则记录该虫为不选择，同时结束本次试验。在同种挥发物同种浓度下，测试雌、雄成虫各30头，每个试虫测试1次。每测试5头试虫Y型管左右臂调换1次方向；测试10头后，更换1次滤纸片和Y型管，以避免干扰，使用乙醇和纯水冲洗Y型管内外臂，200 ℃烘干备用。

1.5 数据分析

1.5.1 触角电位反应数据

EAG测量值由触角电位仪直接读出，EAG相对反应值由公式：EAG相对反应值（mv）= |EAG测量值（mv）| - 前后对照反应均值（mv）^[18]。利用Microsoft Excel 2019对试验数据进行统计、分析。

1.5.2 行为反应数据分析

按下列公式计算河曲丝叶蜂对不同挥发物的诱引率、趋避率、不选择率^[19]：

\mathrm{趋避}\mathrm{率}=b/\left(a+b\right)\times \mathrm{100}\mathrm{\%}

\mathrm{引诱}\mathrm{率}=a/\left(a+b\right)\times \mathrm{100}\mathrm{\%}

\mathrm{不选}\mathrm{择率}=\mathrm{1}-\left(a+b\right)/w\times \mathrm{100}\mathrm{\%}

a为进入处理臂中的河曲丝叶蜂总数，b为进入对照臂的河曲丝叶蜂总数，w为河曲丝叶蜂总数。实验数据采用SPSS Statistics 20.0软件进行统计和分析，选用χ²检验分析趋向性的差异。利用origin 2022制作图。

2 结果与分析

2.1 白柳挥发物的组分

在河曲丝叶蜂成虫羽化高峰期，GC-MS鉴定得到的白柳叶片挥发物成分有16种，主要包括8种烃类化合物、2种萜烯类化合物、2种醇类化合物、1种酯类化合物、1种芳香酸类化合物以及2种酚类化合物（见表2）。烃类化合物是白柳叶片挥发物成分中相对含量最大的一类，总量为36.33%，其中苯乙烯相对含量为16.1%，间二甲苯相对含量为10.50%；其次是酯类化合物，二甲基丁酸叶醇酯这一组分相对含量为24.7%。醇类化合物和酚类化合物含量相似，相对含量总量为15.01%。萜烯类化合物和芳香酸类化合物相对含量较少，其中β-石竹烯和β-蒎烯总量为4.03%，苯甲酸相对含量为1.84%。

2.2 河曲丝叶蜂成虫对部分寄主植物挥发物的触角电位(EAG)反应

未交配1日龄河曲丝叶蜂雄虫对供试的5种白柳树挥发物有明显的EAG反应（见表3）。当浓度为1 000 ng·μL^-1时，β-石竹烯、叶醇、丁香酚、β-蒎烯的EAG反应值均为最高。β-石竹烯1 000 ng·μL^-1的EAG 反应值与浓度为10、100、10 000 ng·μL^-1的反应值存在显著差异（P<0.05），而浓度为10、100、10 000 ng·μL^-1的EAG反应值之间没有显著差异；叶醇1 000 ng·μL^-1的EAG 反应值与浓度为10、100、10 000 ng·μL^-1的反应值存在显著差异（P<0.05），丁香酚、β-蒎烯1 000 ng·μL^-1的EAG反应值与10ng·μL^-1的反应值存在显著差异（P<0.05），与100、10 000ng·μL^-1的反应值没有显著差异。苯甲酸浓度为100 ng·μL^-1时的EAG反应值为最高，且与其他浓度的EAG反应值存在显著性差异（P<0.05）。

未交配1日龄河曲丝叶蜂雌成虫对供试的5种白柳挥发物有明显的EAG反应（见表4）。当浓度为1 000 ng·μL^-1时，β-石竹烯、叶醇、丁香酚、β-蒎烯的EAG反应值均为最高。β-石竹烯和丁香酚1 000 ng·μL^-1的EAG 反应值与浓度为10和100 ng·μL^-1的反应值存在显著差异（P<0.05），与10 000 ng·μL^-1的反应值没有显著差异；叶醇1 000 ng·μL^-1的EAG反应值与10、100和10 000 ng·μL^-1的反应值存在显著差异（P<0.05）；β-蒎烯1 000 ng·μL^-1的EAG反应值与10、100和10 000 ng·μL^-1的反应值存在显著差异（P<0.05），但浓度为10、100、和10 000 ng·μL^-1的EAG反应值之间没有显著差异。苯甲酸浓度为100 ng·μL^-1时的EAG反应值为最高，与浓度10和10 000 ng·μL^-1的反应值存在显著性差异（P<0.05），与浓度为1 000ng·μL^-1的反应值没有显著差异。

2.3 河曲丝叶蜂成虫对部分白柳植物挥发物的行为反应

如图1所示，1 000 ng·μL^-1的丁香酚对1日龄河曲丝叶蜂雄成虫引诱率最高，为71.2%，与对照差异显著（χ²=5.147，P=0.034），反应率也非常大，为95.1%。在1 000 ng·μL^-1浓度下，河曲丝叶蜂雄成虫对叶醇的反应率为84.2%，引诱率为46.7%；其次是β-石竹烯，反应率为72.8%，引诱率为40.3%，引诱率与对照相比皆为不显著（叶醇：χ²=2.255，P=0.182；β-石竹烯：χ²=2.033，P=0.138）；浓度为1 000 ng·μL^-1时苯甲酸的引诱率为33.4%，趋避率为44.5%，差异显著（χ²=1.775，P=0.044），则有驱避作用；β-蒎烯的引诱率在浓度到达1 000 ng·μL^-1时引诱率为35.6%，反应率为71.5%，引诱率与对照差异不显著（χ²=1.766，P=0.069）。

如图2所示，1日龄河曲丝叶蜂雌成虫对丁香酚的引诱行为反应最为显著，此结果与雄虫的行为反应基本一致。丁香酚对1日龄河曲丝叶蜂雌成虫的诱引率和反应率随着浓度的增加而增加，浓度为1 000 ng·μL^-1时达到阈值，诱引率为73.3%，与对照存在差异性极显著（丁香酚：χ²=8.686，P=0.009）。1日龄河曲丝叶蜂雌成虫对β-石竹烯和β-蒎烯的诱引率和反应率随着浓度的增加而增加，浓度均在1 000 ng·μL^-1时达到阈值，在此浓度下β-石竹烯诱引率为41.1%，β-蒎烯的诱引率为36.2%，二者的引诱率与对照均为不显著差异（β-石竹烯：χ²=2.886，P=0.065；β-蒎烯：χ²=3.996，P=0.071）。叶醇的诱引率在100 ng·μL^-1时达到最大，为46.7%，与对照差异不显著（χ²=2.693，P=0.053）。苯甲酸的引诱率在1 000 ng·μL^-1时达到阈值，为33.4%，与对照差异不显著（χ²=2.893，P=0.063）。

3 讨论

植食性昆虫在不同生理期取食或产卵于寄主植物的特定组织和器官，与寄主挥发物具有独特的高度且专一的识别能力，并作出相应的嗅觉行为反应^[20-23]，这个过程中，寄主植物释放的特异性挥发物承担着重要通讯引导作用，利用EAG反应分析引起昆虫电生理反应的植物挥发性化合物，可以为初步筛选驱避或引诱物质提供基础^[24-25]。本研究通过固相微萃取和GC-MS对河曲丝叶蜂寄主植物白柳挥发物进行鉴定，选择了5种化合物在4个浓度梯度下进行EAG测定，结果表明河1日龄河曲丝叶蜂未交配雌雄成虫对5种化合物均有较明显的EAG反应，说明5种物质对河曲丝叶蜂成虫有引诱或驱避活性。总体上，除苯甲酸外，在浓度为1 000 ng·μL^-1时，1日龄河曲丝叶蜂未交配雌雄成虫对不同化合物具有最大EAG反应值，这可能是达到了反应浓度的阈值。其中，1日龄河曲丝叶蜂未交配雄成虫对叶醇浓度为1 000 ng·μL^-1 引起的EAG反应值为最高，为1.71±0.24mV；1日龄河曲丝叶蜂未交配雌成虫对丁香酚浓度为1 000 ng·μL^-1引起的EAG反应值为最高，为1.70±0.87mV；综合不同组分各浓度下EAG值，1日龄河曲丝叶蜂未交配雌雄成虫对叶醇、丁香酚、苯甲酸的EAG反应存在明显差异，对β-石竹烯和β-蒎烯的EAG反应没有明显差异，说明1日龄河曲丝叶蜂未交配雌雄成虫对寄主挥发物不同成分的嗅觉敏感性有差异，其他植食性昆虫也存在类似的情况。如玉带凤蝶Papilio polytes成虫对柑橘枝叶12种挥发性化合物的EAG反应结果显示，在测试剂量最大 (1 000 ng)时，该虫对芳樟醇、柠檬醛等挥发性化合物的EAG反应值已达到拐点；对挥发性化合物叶醇、壬醛、愈创木酚等的反应仍处于上升阶段；对香芹酮的反应已下降^[26]。苹褐带卷蛾Pandemis heparana成虫对寄主植物挥发性化合物的EAG反应存在差异，如雄成虫对萜烯类挥发性化合物的EAG反应值较低，而对醛类、腈类挥发物的平均EAG反应值整体较高^[15]。

昆虫的EAG反应仅表示昆虫对挥发性物质的敏感程度，行为反应才能确定挥发性物质的具体作用。通过河曲丝叶蜂未交配雌雄成虫对5种寄主挥发物不同浓度的行为反应实验，从总体上看，河曲丝叶蜂雌成虫对于寄主植物挥发物的诱引率和反应率普遍高于雄成虫，因为植食性昆虫对产卵场所的选择直接关系到后代的生存发育^[27]，进化学中有一种被称为“preference-performance”学说，该学说表示雌成虫一般会挑选品质较高的寄主，以便交配后在其上产卵^[28-29]。本研究发现5种植物挥发物中只有丁香酚对河曲丝叶蜂未交配雌雄成虫的引诱率与对照相比存在显著性，而叶醇、β-石竹烯、苯甲酸、β-蒎烯对河曲丝叶蜂未交配雌雄成虫的引诱率与对照相比无显著性差异，且河曲丝叶蜂对选取的5种寄主挥发物除叶醇外均在 1 000 ng·μL^-1时反应率最高。通过研究还发现，在1 000 ng·μL^-1的浓度下，雌虫对于丁香酚引诱率和反应率极显著高于对照，在10 000 ng·μL^-1的浓度下的引诱率和反应率也与对照存在显著差异，这一结果与雌虫在该浓度下的EAG反应高度一致；而雄虫在1 000 ng·μL^-1和10 000 ng·μL^-1的浓度下的引诱率和反应率与对照存在显著差异，当挥发物浓度到达10 000 ng·μL^-1时引诱率较1 000 ng·μL^-1时有所下降，因此，丁香酚在雌雄成虫定位寄过程中具有重要作用。而浓度为1 000 ng·μL^-1的叶醇虽能引起雄成虫较强的EAG反应，但雄成虫并未表现出明显的诱虫行为反应，提示河曲丝叶峰雌、雄成虫对不同化合物的行为反应阈值有差异，这一结果与王延来等研究结果一致，即昆虫对植物挥发物的EAG反应与行为反应率并非总是呈正相关^[30]；又如，灰茶尺蠖Ectropis grisescens雌、雄虫对非寄主植物土荆芥Chenopodium ambrosioides、留兰香Mentha spicata和黄花蒿Artemisia annua的精油表现出随浓度而变化的EAG反应，但仅留兰香精油对灰茶尺蠖有显著的驱避作用，黄花蒿和土荆芥精油的定向作用不明显^[31]。

对寄主挥发物组分的敏感性因昆虫交配状态不同而不同^[32,33]。例如，苹褐带卷蛾（Adoxophyes orana）未交配雄成虫对寄主植物挥发性化合物的EAG反应较未交配雌成虫灵敏^[34]，烟草天蛾（Manduca sexta）的雌成虫交配后对寄主植物的反应增强^[35]。而且，这种差异不仅只存在于蛾类中，不同生理状态的番石榴实蝇（Bactrocera correcta）雌、雄成虫对寄主番石榴气味具有不同的敏感性和选择性，已交配雌成虫反应最强，其次是性成熟未交配的雄成虫，性未成熟的雄成虫反应最弱^[36]。本研究只研究了河曲丝叶蜂未交配雌雄成虫对5种寄主挥发物的敏感性，已经交配雌虫的敏感性有待研究。

昆虫一直生活在多种气味背景的化学环境中，不同植物的挥发物均以特定的成分和比例构成独有的化学指纹谱，对昆虫精准定位寄主非常重要^[37-39]。本研究只测定了5种单体化合物以及在一定的浓度梯度下对1日龄河曲丝叶蜂未交配成虫的触角电位和行为反应，获得了一些结论。但是以单一组分的识别确定其作用机制是不够全面的，因此，在后续的研究中有必要对其他11种化合物、不同挥发物混合成分以及比例进行触角电位反应和行为反应验证，进一步测定河曲丝叶蜂对挥发物多组分不同比例和不同浓度梯度的选择，以便筛选出对河曲丝叶蜂成虫具有高效引诱和趋避作用的挥发物组分和浓度，为以后河曲丝叶蜂的绿色无公害防治提供参考。

4 结论

本研究在河曲丝叶蜂成虫羽化高蜂期，鉴定了西藏拉萨白柳叶片挥发物共16种，在相对含量大于1%的化合物中选择了叶醇、丁香酚、苯甲酸、β-石竹烯、β-蒎烯5种化合物进行触角电位和行为反应实验，这5种化合物均能引起1日龄河曲丝叶蜂未交配雌雄成虫明显的EAG反应，室内行为反应结果表明丁香酚对河曲丝叶蜂未交配雌雄成虫有较强的吸引作用，说明其是河曲丝叶蜂成虫定位寄主过程中起重要作用的物质之一。

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基金资助

西藏自治区科技计划项目(XZ202201ZY0015N)

西藏农牧学院研究生教育创新计划项目(YJS2023-44)