大鼠原代细胞血脑屏障模型的建立及穿膜肽评价

摘要

中枢神经系统疾病患者比例高且呈明显增长趋势，严重危害社会健康，而血脑屏障是阻碍该类药物开发的主要原因之一.该研究为解决缺乏稳定的高通量中枢神经系统药物筛选模型问题，优化一种可靠的体外血脑屏障模型完成药物早期开发筛选工作.由于原代细胞构建的血脑屏障模型具有更真实的体内环境与特异性，该文采用Transwell装置建立体外大鼠原代内皮细胞血脑屏障模型，通过检测跨内皮电阻阻抗（TEER值）、相关受体表达、小分子渗透性等质控该模型，实现体外血脑屏障渗透性的检测，以筛选可透过血脑屏障的多肽，并进行竞争性实验推测透血脑屏障的方式.结果表明构建的模型TEER值达（383±70）Ω·cm²,且高表达相关受体蛋白，通过该模型验证已知的中枢神经系统与非中枢神经系统药物渗透性具有显著性差异，为药物转运与运输提供可靠的研究工具；并获得一种透血脑屏障肽Peplib-14003,推测其透过血脑屏障的方式为LRP-1介导的胞吞作用，是一种新型潜在的可用于药物转运研究的候选载体分子.所构建的模型完整性高，功能性好，更为接近真实的体内血脑屏障特性，可用于评价穿膜肽.

关键词

脑微血管内皮细胞 / 血脑屏障 / TEER值 / 紧密连接 / 受体蛋白