基于METTL14-m6A-FOXO3A信号通路介导的细胞自噬探讨补肾强督方抑制炎症治疗强直性脊柱炎的机制研究

吴琳; 李松倍; 苏晓庆; 韩天然; 李泽光

doi:10.13210/j.cnki.jhmu.20241106.002

海南医科大学学报 ›› 2025, Vol. 31 ›› Issue (02) : 94 -101. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20241106.002

基于METTL14-m⁶A-FOXO3A信号通路介导的细胞自噬探讨补肾强督方抑制炎症治疗强直性脊柱炎的机制研究

吴琳, 李松倍, 苏晓庆, 韩天然, 李泽光

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摘要

目的：观察补肾强督方对T淋巴细胞METTL14-m⁶A-FOXO3A信号通路介导的细胞自噬的影响，从而明确其抑制炎症、治疗强制性脊柱炎的分子机制。方法：使用Jurkat细胞，采用抗CD3联合抗CD28抗体诱导24 h构建细胞模型，并给予补肾强督方含药血清和METTL14重组蛋白进行干预。采用ELISA法检测炎症因子（IL-23和IL-17A）和氧化应激指标的水平，流式细胞术检测ROS水平，Western blot法检测自噬相关蛋白、METTL14和FOXO3A的表达，RT-qPCR检测METTL14和FOXO3A的表达，斑点杂交实验检测FOXO3A的m⁶A甲基化水平。结果：与模型组比较，补肾强督方显著降低Jurkat细胞上清中IL-23、IL-17A和MDA的含量与ROS的水平，增加SOD和GSH-Px的活性，差异均具有统计学意义（P<0.01）。此外，补肾强督方能显著上调Jurkat细胞中Beclin-1、FOXO3A和METTL14蛋白和基因的表达和增加LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值，下调p62蛋白的表达，与模型组比较差异均具有统计学意义（P<0.01）。在此基础之上，与模型组比较，补肾强督方能显著上调Jurkat细胞FOXO3A的m⁶A甲基化水平，差异均具有统计学意义（P<0.01）。结论：补肾强督方通过METTL14介导的FOXO3A的m⁶A甲基化修饰促进T细胞自噬，从而达到治疗强直性脊柱炎的作用。