基于周期阻滞和氧化-抗氧化失衡研究槟榔碱致小鼠骨髓细胞DNA损伤的机制

摘要

目的：研究槟榔碱（arecoline,ARC）体内对小鼠骨髓细胞DNA的损伤作用，并探讨其作用机制。方法：采用单细胞凝胶电泳实验分析ARC对小鼠骨髓细胞DNA损伤作用。采用流式细胞术、DCFH-DA荧光染色、罗丹明123染色等方法对小鼠骨髓细胞的细胞周期，超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性和谷胱甘肽（glutathione,GSH）、丙二醛（malondial dehyde,MDA）、活性氧（reactive oxygen species,ROS）含量，线粒体膜电位（Δψm）,p53蛋白含量进行分析。结果：给予ARC1/2 LD₅₀剂量可引起小鼠骨髓细胞DNA损伤，与空白组相比拖尾现象较严重。随着ARC给药剂量的增加，G₀/G₁期的细胞比例明显增加（P<0.01），使骨髓细胞周期停滞在G₀/G₁期。ARC作用小鼠骨髓细胞后，SOD活性和GSH含量明显降低（P<0.01）,MDA和ROS含量明显升高（P<0.01），并且随着ARC浓度增加，Δψm明显降低（P<0.01）。ARC给药组骨髓细胞内p53蛋白含量随给药剂量的增加而明显升高（P<0.01），呈一定的剂量依赖关系。结论：ARC能造成小鼠骨髓细胞DNA损伤，可增加p53蛋白表达诱导小鼠骨髓细胞周期阻滞在G₀/G₁期，引起Δψm降低，ROS增加，脂质过氧化增强，抗氧化功能受到严重损害，氧化和抗氧化失衡，这些是ARC引起小鼠骨髓细胞DNA损伤的机制。

关键词

槟榔碱 / 骨髓细胞 / DNA损伤 / G₀/G₁期阻滞 / 氧化-抗氧化失衡