牙周膜间充质干细胞/细胞外基质复合体成骨潜能的体外研究

摘要

目的 比较主动与被动形成的人牙周膜间充质干细胞/细胞外基质复合体（C-MSC）的体外成骨分化潜能差异，为主动构建的C-MSC用于骨缺损治疗提供实验依据。方法 体外提取人牙周膜干细胞，构建主动形成与被动形成的CMSC，进行形态学检测；苏木精—伊红染色进行组织学检测；通过TUNEL染色（原位末端转移酶标记技术）检测CMSC中细胞凋亡水平；免疫荧光染色检测细胞外基质中成骨相关蛋白的表达；定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测成骨相关因子及蛋白的表达水平。结果 形态学结果显示主动形成的C-MSC结构更加致密且具有弹性。苏木精—伊红染色结果表明，主动形成的C-MSC较被动形成的C-MSC具有更多的细胞及细胞外基质，细胞间连接更加紧密。TUNEL染色结果提示，两组C-MSC均具有良好的细胞活性；免疫荧光结果显示主动形成的C-MSC细胞外基质中成骨相关蛋白表达量更高；定量PCR和蛋白质印迹法结果表明，主动形成的C-MSC中成骨相关基因及蛋白（碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原、Runt相关转录因子2、成骨细胞特异性转录因子）表达量更高。结论 主动形成的C-MSC较被动形成的C-MSC具有更好的成骨分化能力，在骨缺损再生治疗中更具应用潜能。

关键词

人牙周膜间充质干细胞 / 干细胞/细胞外基质复合体 / 骨缺损修复 / 细胞外基质 / 成骨蛋白