康艾注射液影响结直肠癌奥沙利铂耐药的作用机制研究

摘要

目的 通过网络药理学、分子对接及实验验证探讨康艾注射液对结直肠癌奥沙利铂耐药的作用机制。方法 通过TCMSP、GeneCards等数据库分别收集康艾注射液的活性成分及其作用靶点、结直肠癌奥沙利铂耐药相关靶点，并获取二者的交集靶点。构建“康艾注射液活性成分—结直肠癌奥沙利铂耐药靶点”网络图，筛选主要活性成分，构建蛋白质互作网络，筛选关键靶点。利用DAVID数据库对相关基因进行基因本体论及京都基因与基因组百科全书通路富集分析。采用Autodock Vina软件进行分子对接分析。体外培养人结肠癌细胞系HCT116及其奥沙利铂耐药细胞株HCT116/L，通过CCK-8实验检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡，定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测相关基因和蛋白表达。结果 共获得康艾注射液活性成分和结直肠癌奥沙利铂耐药交集靶点184个，主要活性成分有华良姜素、二氢异黄酮等，关键靶点包括TP53、AKT1和EGFR等。基因本体论富集分析显示药物主要参与凋亡调控、应激反应等过程，京都基因与基因组百科全书通路富集分析结果表明药物主要调控PI3K-AKT等信号通路。分子对接分析显示主要活性成分和关键靶点蛋白具有较强的结合能力。实验表明，康艾注射液能抑制HCT116/L细胞的活力，提高凋亡率，上调TP53mRNA表达，下调EGFR mRNA表达，抑制PI3K-AKT[信号]通路的激活，且呈剂量依赖性。结论 康艾注射液通过上调TP53、下调EGFR和抑制PI3K-AKT[信号]通路逆转结直肠癌奥沙利铂耐药。

关键词

康艾注射液 / 结直肠癌 / 奥沙利铂耐药 / 网络药理学 / 分子对接 / PI3K-AKT[信号]通路