AMPK/mTOR信号通路介导的自噬在模拟高海拔视网膜病变中的作用

摘要

目的 探究AMP活化蛋白激酶（AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路介导的自噬在模拟高海拔视网膜病变（HAR）中的作用及其潜在分子机制。方法 选取6～8周龄雄性C57BL/6小鼠。模型组置于低压氧舱连续暴露24 h，模拟海拔5 000 m环境，对照组在常压、常氧环境下饲养。采用苏木精-伊红染色对小鼠视网膜组织进行病理学改变分析；采用二氢乙啶探针检测小鼠视网膜组织中活性氧含量；采用免疫荧光检测小鼠视网膜组织中8-OHdG表达水平；采用Western blotting检测小鼠视网膜组织中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、活化型半胱氨酸蛋白酶-3,AMPK、mTOR及其磷酸化形式，以及LC3B、P62的表达水平，免疫荧光进一步验证LC3B和P62表达情况。结果 与对照组相比，模型组视网膜组织病理损伤显著；二氢乙啶探针发现模型组视网膜组织活性氧表达增加，免疫荧光显示8-OHdG表达显著上调。Western blotting检测结果显示模型组中Bax及C-半胱氨酸蛋白酶-3，蛋白表达显著升高，揭示细胞凋亡增强；模型组磷酸化AMPK表达降低，磷酸化mTOR表达升高，LC3B表达下降而P62表达升高，提示自噬流受阻。结结论 AMPK/mTOR信号通路介导的自噬失衡可能是HAR发生发展的重要分子机制。

关键词

高海拔视网膜病变 / AMPK/mTOR信号通路 / 自噬 / 氧化应激 / 细胞凋亡