沉默NAC-1基因对人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP裸鼠移植瘤化疗敏感的影响

摘要

目的:探讨核转录因子NAC-1基因沉默对人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP裸鼠移植瘤化疗敏感性的影响。方法:采用LV4-LUC-GFP慢病毒转染建立NAC-1基因沉默SKOV3/DDP细胞株，将细胞接种到免疫缺陷小鼠皮下，建立人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP裸鼠移植瘤模型，给予顺铂化疗，比较NAC-1基因沉默对SKOV3/DDP在裸鼠体内增殖的影响。取肿瘤组织进行转录组测序，利用Illumina平台进行转录组mRNA测序，筛选差异表达基因，并进行GO和KEGG功能注释和富集分析，揭示NAC-1基因影响移植瘤化疗敏感的可能分子机制。使用STRING数据库构建DEGs编码蛋白互作网络，筛选MCC算法、Degree算法、Closeness算法3种算法共有基因作为关键基因，使用Metascape网站在线分析这些共同基因的基因功能。结果:与对照组相比，抑制NAC-1基因后裸鼠皮下肿瘤体积变小，重量减轻，差异有统计学意义(P<0.05)。转录组学分析显示，抑制NAC-1基因导致肿瘤组织中460个基因显著下调，568个基因显著上调。差异基因(DEGs)在多项GO富集类别中具有显著差异，如细胞代谢、有丝分裂、坏死、炎症、信号传递等。KEGG功能富集结果显示，NAC-1基因沉默可能影响了细胞因子-细胞因子受体相互作用、白细胞跨内皮迁移、神经活性配体-受体相互作用、细胞黏附分子、坏死、ECM受体相互作用、PI3K-Akt信号通路、NF-κB信号通路等。筛选获得的关键基因主要富集在白细胞介素的信号传导、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)通路、炎症反应等通路。结论:抑制NAC-1基因能提高人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP化疗敏感性，其可能通过多个信号通路影响肿瘤细胞的代谢、增殖、死亡、炎症反应等。

关键词

NAC-1 / 卵巢癌细胞 / 顺铂耐药 / 转录组分析