Apelin对滋养细胞生物学功能的影响及对子痫前期样小鼠的治疗作用

摘要

目的:探讨Apelin对滋养细胞系生物学功能的影响及其对子痫前期(PE)样小鼠的治疗作用。方法:Western blot法检测正常妊娠者和PE患者胎盘组织中Apelin蛋白水平。RT-qPCR和Western blot法检测滋养细胞中Apelin mRNA和蛋白水平。细胞免疫荧光检测Apelin在滋养细胞中的定位情况。无标记细胞增殖实验、克隆形成实验以及EdU荧光染色检测Apelin对滋养细胞增殖能力的影响。细胞划痕实验和Transwell小室检测Apelin对滋养细胞迁移和侵袭能力的影响。血管形成实验检测Apelin对滋养细胞血管形成能力的影响。Western blot法检测对照组、不同浓度Apelin刺激组和Apelin抑制剂组基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、N钙黏蛋白(N-cadherin)、E钙黏蛋白(E-cadherin)、Erk、P-Erk蛋白水平。构建PE样小鼠模型，并给予Apelin注射治疗，检测各组小鼠的收缩压和尿蛋白水平及小鼠的活胎比例、胎鼠重量、胎盘重量及二者比值。结果:PE患者胎盘组织中Apelin水平降低。3种滋养细胞中，Apelin均存在表达且定位于胞质。在细胞生物学功能方面，Apelin对滋养细胞的增殖能力无明显影响，但通过上调MMP-2和N-cadherin表达而促进滋养细胞的迁移和侵袭能力。血管形成实验证明，Apelin可促进滋养细胞的血管形成能力。Western blot法结果表明，Apelin对MAPK/ERK通路中Erk蛋白磷酸化水平有促进作用。PE小鼠模型的结果显示，Apelin可缓解其临床症状，并提高小鼠的胚胎存活率和发育水平。结论:Apelin在PE患者胎盘组织中表达降低，并可通过上调滋养细胞的迁移、侵袭和血管形成能力，对PE样小鼠具有治疗作用，可能成为PE的潜在治疗靶点。

关键词

Apelin / 子痫前期 / 滋养细胞 / MAPK/ERK通路 / 迁移 / 血管形成