大肠埃希菌对细粒棘球蚴活性影响的体外研究

摘要

目的 研究细粒棘球蚴与特定浓度大肠埃希菌体外共培养的条件下活性、形态随时间的变化，以及部分参与通路。方法 将羊源性原头蚴重悬计数，分为空白组、0.5麦氏浓度大肠埃希菌组（实验组）,并以12、24、48、72、96 h为时间节点，使用0.1%伊红染液按照体积1∶1的比例染色2 min后显微镜下观察并计算两组原头蚴的存活率；使用活性氧试剂盒在上述时间点检测两组原头蚴体内ROS水平；在12、48、96 h分别检测Caspase-3、9;Bax、Bcl-2、Nrf2蛋白的表达水平。结果 实验组原头蚴存活率随时间延长降低，在96 h降至为0%;两组原头蚴体内活性氧检测显示：实验组ROS水平明显提高，12 h最高，差异具有统计学意义（T=11.638,P<0.05）,在72 h ROS水平与空白组相近；Western blot实验表明，凋亡蛋白Bax（T=4.997,P<0.05）、Caspase-3蛋白（T=6.118,P<0.05）、Caspase-9蛋白（T=3.435,P<0.05）,实验组的蛋白水平大于空白组，有统计学意义。抗凋亡蛋白Bcl-2,实验组的蛋白水平小于空白组，有统计学意义（T=9.184,P<0.05）,两组Nrf2蛋白水平差异无统计学意义（T=0.902,P=0.418）。结论 0.5 mol·L^-1大肠埃希菌在体外可以快速致细粒棘球蚴死亡，氧化应激通路可能参与了此过程。

关键词

细粒棘球蚴 / 大肠埃希菌 / 活性氧(ROS) / Bcl-2蛋白 / Nrf2蛋白