单核细胞増生李斯特菌LIPI-4对脑及脑微血管内皮细胞炎症小体表达的影响

摘要

目的 探究单核细胞増生李斯特菌毒力岛4(LIPI-4)对小鼠脑及脑微血管内皮细胞炎症小体产生的影响。方法 小鼠腹腔注射细菌Lm928和Lm928ΔLIPI-4,采用甲酞胺一紫外分光光度法检测脑组织中伊文思蓝(EB)的含量，ELISA方法检测小鼠血清中髓鞘碱性蛋白(MBP)的水平，qRT-PCR法检测脑组织中炎症小体AIM2、NLRP3、NLRC4,炎症因子IL-1β、IL-18等的表达。qRT-PCR、Western Blot和ELISA检测Lm928、Lm928ΔLIPI-4和CLm928ΔLIPI-4侵染人脑微血管内皮细胞(HCMEC/D3)过程中炎症小体相关分子及炎症因子表达的水平。结果 小鼠感染Lm928 36 h后脑内EB显著升高，72 h后，血清中MBP含量极显著高于Lm928ΔLIPI-4组(P<0.01),qRT-PCR结果显示Lm928组小鼠脑组织NLRC4和IL-1β的mRNA表达量显著高于Lm928ΔLIPI-4组(P<0.05)。在侵染HCMEC/D3细胞中，NLRP3和IL-1β的mRNA表达量，Lm928组极显著高于Lm928ΔLIPI-4组(P<0.01);NLRP3的蛋白表达量，Lm928组极显著高于Lm928ΔLIPI-4组(P<0.01);上清液中IL-1β的分泌量，Lm928组极显著高于Lm928ΔLIPI-4组(P<0.01)。结论 单核细胞增生李斯特菌LIPI-4通过参与NLRP3/NLRC4/IL-1β通路，激活炎症小体参与炎症反应，损伤脑组织与脑微血管内皮细胞，破坏血脑屏障。

关键词

Lm / LIPI-4 / HCMEC/D3 / 炎症小体 / 血脑屏障