敬钊缨毛蛛肽类毒素JZTX-V中JZ-VF3片段对巨噬细胞炎症反应的抑制作用及机制研究

摘要

目的 探究敬钊缨毛蛛肽类毒素JZTX-V中的多肽片段对巨噬细胞炎症反应的抑制作用，并探究相关机制。方法 通过免疫印迹法检测来自JZTX-V的3个多肽片段对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激的RAW 264.7细胞中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)表达的作用；通过Griess反应检测细胞上清液中一氧化氮(nitric oxide, NO)浓度，通过异鲁米诺化学发光检测超氧化物的产生量；通过实时荧光定量PCR检测细胞中促炎细胞因子mRNA的表达量；通过免疫印迹法检测JZ-VF3对丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)和核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路的影响，并用免疫荧光检测JZ-VF3对p65的核转位的影响。结果 与LPS刺激组相比，用JZ-VF3处理RAW 264.7细胞可以显著抑制iNOS的激活及NO和超氧化物的产生，还可以抑制细胞中促炎细胞因子的产生。蛋白免疫印迹和免疫荧光实验揭示，JZ-VF3可以抑制MAPK和NF-κB信号通路的激活，以及p65的核转位。结论 JZTX-V中的JZ-VF3多肽片段通过抑制MAPK和NF-κB信号通路的激活，从而抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞中的炎症反应，具有成为多肽抗炎药的潜力。

关键词

敬钊缨毛蛛 / 炎症 / 巨噬细胞 / MAPK信号通路 / NF-κB信号通路