细粒棘球蚴囊液外泌体通过JAK2/STAT3信号通路调控小鼠肝癌细胞Hepa1-6增殖与凋亡

摘要

目的 探究细粒棘球蚴囊液中外泌体的存在并探讨其是否通过JAK2/STAT3信号通路调控小鼠肝癌细胞Hepa1-6的增殖、凋亡。方法 使用囊液直接干预Hepa1-6细胞，CCK8、EdU检测囊液对其增殖能力的影响；使用超速离心法对细粒棘球蚴囊液外泌体进行提取，并使用透射电镜、Western-Blotting、粒径分析对其进行验证；通过外泌体-PKH67吞噬试验验证外泌体进入细胞情况；通过CCK8、EDU等检测细粒棘球蚴囊液外泌体对Hepa1-6细胞增殖的作用；使用Western-Blotting检测外泌体对Hepa1-6细胞凋亡的作用；通过Western-Blotting检测JAK2/STAT3信号通路相关蛋白的表达情况并通过相关性研究探讨此通路与肝癌细胞增殖的关系。结果 1.细粒棘球蚴囊液促进Hepa1-6增殖；2.Western-Blotting结果显示细粒棘球蚴囊液外泌体表面标志物CD63,CD9,TSG101表达阳性；3.透射电镜可见外泌体形态为双层膜结构的盘状囊泡，粒径分析显示囊泡直径分布区间为159.2±81.1 nm; 4.外泌体24 h可进入细胞内；5.CCK8、EdU结果显示细粒棘球蚴囊液外泌体在24、48 h均可促进Hepa1-6细胞的增殖(P<0.05);6. Western-Blotting结果显示细粒棘球蚴囊液外泌体在干预Hepa1-6 24 h、48 h时均促进Bcl-2的表达，且随着浓度增加促进作用增加(P<0.05),Bax、caspase-3、caspase-9表达量降低，随着浓度增加抑制作用增强；7. Western-Blotting结果显示细粒棘球蚴囊液外泌体干预Hepa1-6 24h后t-JAK2、t-STAT3表达量无明显变化，p-JAK2、p-STAT3蛋白表达随着外泌体浓度增加而增加，且与肝癌细胞增殖存在正相关。结论 细粒棘球蚴囊液及其外泌体可以通过JAK2/STAT3信号通路促进Hepa1-6增殖，同时抑制其凋亡。

关键词

细粒棘球蚴囊液 / 外泌体 / 肝癌 / 增殖 / 凋亡 / JAK2/STAT3