LncRNA PVT1与EIF4A1促进STC1表达影响胃癌的作用机制初探

摘要

目的 探索长链非编码RNA人浆细胞瘤转化迁移基因1（plasmacytoma variant translocation 1,PVT1）与真核翻译起始因子4A1（human eukaryotic initiation factor4A1,EIF4A1）促进锡钙素-1（Stanniocalcin-1,STC1）表达在胃癌中的作用。方法 采用慢病毒在胃癌细胞SGC7901单独或共同过表达lncRNA PVT1和EIF4A1,采用real time-PCR检测lncRNA PVT1表达水平，Western blot检测EIF4A1表达量。采用Western blot检测STC1在不同过表达组及对照细胞中的表达量。采用4D-DIA定量蛋白质组学技术检测受lncRNA PVT1/EIF4A1调控的蛋白。采用免疫组织化学法检测STC1在胃癌组织和对应癌旁对照组织中的表达量，与lncRNA PVT1、EIF4A1表达水平及病理特征进行相关性分析。采用CCK-8法检测EIF4A1抑制剂CR-1-31-B在SGC-7901细胞系中的IC₅₀值，采用最佳浓度的CR-1-31-B处理细胞，再次检测STC1蛋白的表达变化。采用MTT和Transwell法检测干扰STC1后，胃癌细胞增殖、迁移能力变化。结果 蛋白质组学结果显示，STC1在lncRNA PVT1/EIF4A1共同过表达组表达上调（FC>1.5,P<0.05）。相比对应癌旁对照组织，STC1在胃癌组织中表达升高（P<0.05）。STC1与lncRNA PVT1、EIF4A1的表达具有相关性（P<0.05）。STC1的表达水平与胃癌分型、分化程度、肿瘤深度、淋巴结转移具有相关性（P<0.05）,但与年龄、性别无关。STC1在lncRNA PVT1过表达、EIF4A1过表达及lncRNA PVT1/EIF4A1共同过表达的细胞中表达依次升高（P<0.05）。抑制剂的最佳作用浓度为22.78nM,在lncRNA PVT1表达上调的胃癌细胞中，抑制EIF4A1的细胞较未抑制的细胞STC1的表达水平低（P<0.05）。干扰STC1后，胃癌细胞的增殖、迁移能力受到抑制（P<0.05）结论 LncRNA PVT1可能通过激活EIF4A1的翻译起始活性促进STC1的表达，进而影响胃癌的进展。

关键词

胃癌 / LncRNA PVT1 / EIF4A1 / STC1