CST4对SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭的影响

摘要

目的 生信分析胱抑素4(cystatins,CST4)在胃腺癌患者中的表达及预后情况，体外细胞实验检测CST4对SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas, TCGA)用于分析CST4在胃腺癌组织与癌旁组织中的表达差异。利用R包建立诊断的受试者工作特征(receiver operating characteristic curve, ROC)曲线，用于分析CST4对胃腺癌的诊断价值。使用R语言软件分析CST4表达与胃腺癌患者预后及免疫细胞浸润的关系。体外培养SGC-7901细胞，上调/下调CST4后，CCK8实验和平板克隆实验验证CST4对SCG-7901细胞增殖能力的影响；划痕实验和Transwell实验检测CST4对SCG-7901细胞迁移和侵袭能力的影响；蛋白印记(Western Blot, WB)实验检测CST4对SGC-7901细胞中上皮型钙粘蛋白(E-cadherin)和神经型钙粘蛋白(N-cadherin)表达的影响；WB实验检测SCG-7901细胞PI3K/AKT通路中关键蛋白表达的变化。结果 生信分析结果表明，CST4在胃腺癌组织中的表达水平高于癌旁组织(P<0.001)。ROC曲线分析表明，CST4可成为胃腺癌组织的诊断标志物(AUC=0.944)。R语言软件分析表明，高表达CST4的胃腺癌患者预后差。反之，低表达CST4的胃腺癌患者预后好(P<0.05)。免疫细胞浸润结果分析表明，CST4的表达水平与免疫细胞浸润丰度相关。CCK8、平板克隆、划痕、Transwell实验的结果显示，上调/下调CST4可促进/抑制SCG-7901细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。WB结果表明，上调/下调CST4会使E-cadherin蛋白表达量降低/增加(P<0.01),N-cadherin蛋白表达增加/降低(P<0.01)。WB结果表明，相比于对照组，上调/下调CST4后p-PI3k和p-AKT蛋白表达量增加/降低，p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT的比值升高/降低(P<0.05)。结论 CST4可调控SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭的能力。

关键词

胱抑素4 / 人胃腺癌细胞 / 增殖 / 迁移 / 侵袭