绵羊清道夫受体MARCO原核表达及组织表达分析

摘要

目的 本研究旨在制备绵羊胶原样结构巨噬细胞受体(Macrophage receptor with collagenous structure, MARCO)多克隆抗体，分析MARCO蛋白在不同组织中的表达水平。方法 本研究通过实时荧光定量PCR的方法来对绵羊各组织中MARCO的mRNA表达水平进行相对定量分析，并在BL21大肠杆菌中诱导表达，离心获得MARCO重组蛋白包涵体沉淀，利用MARCO包涵体蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体，通过ELISA和Western blot测定抗体的效价和特异性，利用Western blot检测绵羊各组织中的MARCO蛋白表达水量。结果 MARCO mRNA在各组织中都有表达，在肺脏、淋巴结和扁桃体中MARCO转录水平相对较高；成功诱导表达MARCO重组蛋白，免疫获得的抗体效价较高，特异性强；MARCO蛋白在肺脏、肝脏、脾脏和淋巴结均有表达，但在肺泡巨噬细胞、肾脏与小肠中表达量较低，几乎不表达。结论 本研究首次证实绵羊MARCO蛋白在肺泡巨噬细胞不表达，在肺脏、淋巴结中高水平表达，也为进一步研究MARCO蛋白功能提供检测手段。

关键词

胶原样结构巨噬细胞受体 / 清道夫受体 / 原核表达 / 组织表达分析 / 绵羊

基金资助

国家自然科学基金项目(32360901); 新疆生产建设兵团指导性科技计划项目(2023ZD042); 新疆维吾尔自治区科学基金项目(2022D01B197)