松果菊苷调控TLR4介导的AKT/Nrf2/NLRP3信号通路改善LPS诱导的小胶质细胞神经炎症

摘要

目的 本研究通过网络药理学结合体外实验探究松果菊苷(Echinacoside, ECH)在脂多糖(LPS)刺激的小胶质细胞中的抗神经炎症作用并探讨其可能的机制。方法 运用网络药理学筛选松果菊苷治疗神经炎症的关键靶点，构建PPI蛋白互作网络，并进行GO及KEGG富集分析。采用CCK-8法评估ECH对小胶质细胞活力的影响；利用DCFH-DA荧光探针检测活性氧(ROS)的表达；Western blot法检测细胞中的iNOS、IL-1β、TNF-α、TGF-β、TLR4、MYD88、AKT、Nrf2、NLRP3、Caspase-1、IL18、IBA-1的蛋白表达。结果 “松果菊苷”与“神经炎症”共得到124个交集靶点。KEGG富集分析显示，松果菊苷主要通过对MAPK信号通路、阿尔兹海默症、Ras信号通路、PI3K/AKT信号通路等改善神经炎症。细胞实验显示，松果菊苷能抑制LPS诱导的小胶质细胞炎症反应，降低细胞iNOS、IL-1β、TNF-α表达(P<0.01),促进细胞TGF-β表达(P<0.01)。ECH能够抑制小胶质细胞激活。ECH能抑制由LPS引起的小胶质细胞内ROS的升高(P<0.001)。ECH抑制TLR4、MYD88、p-AKT、NLRP3、Caspase-1、IL1β、IL-18(P<0.01)的表达，促进Nrf2的表达(P<0.05)。结论 松果菊苷通过调控TLR4介导的AKT/Nrf2/NLRP3炎症信号通路发挥抗神经炎症作用。

关键词

神经炎症 / 松果菊苷 / 小胶质细胞 / 网络药理学