外源性瘦素通过上调星形胶质细胞GLT-1和GLAST的表达减轻小鼠脑缺血再灌注引起的谷氨酸兴奋毒性损伤

摘要

目的 探究外源性瘦素（Leptin）对小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其内在机制。方法 将100只C57BL/6小鼠随机分为5组：假手术（Sham）组、脑缺血/再灌注模型组（I/R组）、瘦素低剂量组（Leptin-L组，0.5 mg/kg）、瘦素中剂量组（LeptinM组，1 mg/kg）和瘦素高剂量组（Leptin-H组，2 mg/kg）,20只/组。采用改良线栓法复制小鼠局灶性脑缺血/再灌注模型，缺血1.5 h再灌注24 h后进行神经功能评分评估神经功能缺损程度，TTC染色测定脑梗死面积，HE染色观察皮层脑组织病理变化，退化神经元染色观察皮层神经元变性损伤程度，免疫组织化学染色测定皮层脑组织胶原酸性纤维蛋白的表达和形态变化，Western blot测定皮层脑组织胶原酸性纤维蛋白蛋白表达。在此基础上，另将45只C57BL/6小鼠随机分为Sham组、I/R组和Leptin组（1 mg/kg）,15只/组。谷氨酸检测试剂盒检测皮层脑组织谷氨酸含量，免疫组织化学染色测定皮层谷氨酸-天冬氨酸转运体（GLAST）和谷氨酸转运体1(GLT-1)表达，Western blotting测定GLAST、GLT-1蛋白表达。结果 与I/R组比较，瘦素明显降低小鼠神经功能缺损评分（P<0.0001），缩小脑梗死面积（P<0.001），减轻皮层脑组织病理损伤程度，降低皮层神经元损伤程度（P<0.0001），维持星形胶质细胞正常形态及降低星形胶质细胞的过度增生和表达（P<0.01），使GLT-1、GLAST表达上调（P<0.01、P<0.05），脑组织谷氨酸含量降低（P<0.01）。结论 外源性瘦素对小鼠脑缺血再灌注损伤具有明显的神经保护作用，其机制可能与调节星形胶质细胞过度增生和上调GLT-1、GLAST的表达从而降低谷氨酸的兴奋毒性损伤有关。

关键词

瘦素 / 脑缺血再灌注损伤 / 星形胶质细胞 / GLT-1 / GLAST / 兴奋性毒性