双术汤通过P53/SLC7A11/GPX4通路诱导胃癌细胞铁死亡

摘要

目的 探讨双术汤调控胃癌铁死亡的机制。方法 基于网络药理学筛选双术汤与胃癌铁死亡的共同靶点，通过生物信息学分析（差异基因、HPA数据库、生存分析）及分子对接验证核心靶点。细胞实验分为对照组（未经任何干预的AGS细胞）、双术汤组（经双术汤含药血清干预的AGS细胞）、双术汤+铁死亡抑制剂组Fer-1（经双术汤含药血清和铁死亡抑制剂Fer-1共同干预的AGS细胞）、铁死亡抑制剂组（仅经Fer-1干预的AGS细胞）4组，检测细胞活力、铁死亡相关指标（活性氧、铁离子、谷胱甘肽）、P53/SLC7A11/GPX4表达水平及线粒体形态的改变。动物实验分为对照组（生理盐水灌胃）、双术汤组（双术汤灌胃）、双术汤+Fer-1组（双术汤灌胃+腹腔注射Fer-1）、Fer-1组（腹腔注射Fer-1），检测裸鼠肿瘤体积与质量、HE染色评估肿瘤病理情况，评估P53/SLC7A11/GPX4表达水平。结果 双术汤主要活性成分为槲皮素、汉黄芩素，与核心靶点P53结合紧密。双术汤能够抑制AGS细胞增殖，以高剂量浓度的抑制作用最明显（P<0.05）；与对照组及双术汤+Fer-1组比较，双术汤组ROS和Fe²⁺均升高（P<0.05）,P53蛋白及mRNA表达水平升高，SLC7A11、GPX4蛋白及基因水平降低（P<0.05）；与双术汤组相比，Fer-1组ROS和Fe²⁺均降低（P<0.05）,P53蛋白及mRNA表达水平降低（P<0.05）,SLC7A11、GPX4蛋白、基因水平升高（P<0.05）。对照组线粒体形态正常，双术汤组线粒体皱缩、嵴模糊甚至消失、膜密度升高；双术汤+Fer-1组线粒体损伤程度较前减轻，Fer-1组线粒体形态与对照组相似。双术汤组肿瘤体积和质量低于对照组（P<0.05），肿瘤排列紊乱并出现坏死，而联合Fer-1后坏死减轻。与对照组相比，双术汤组P53蛋白及mRNA表达升高，SLC7A11和GPX4蛋白及基因表达降低（P<0.05）；与双术汤组相比，双术汤+Fer-1组ROS和Fe²⁺水平降低（P<0.05）,P53表达下降，SLC7A11和GPX4表达升高（P<0.05）。结论 双术汤能够抑制胃癌皮下移植瘤及胃癌细胞生长，其机制与P53/SLC7A11/GPX4轴诱导胃癌铁死亡有关。

关键词

胃癌 / 网络药理学 / 生物信息学 / 分子对接 / 双术汤 / 铁死亡 / P53/SLC7A11/GPX4通路