维生素A缺乏联合CCl₄诱导制备稳定的小鼠慢性肝纤维化模型

摘要

目的 采用维生素A（VA）缺乏饲料饲喂联合低浓度CCl₄诱导，制备一种稳定的慢性肝纤维化动物模型。方法 126只Balb/c小鼠随机分3组，分别给予VA正常饲料（VAN组）、500 IU/kg VA（VAD组1）及200 IU/kg VA（VAD组2）饲料饲养，4周后每组选取6只小鼠检测血清视黄醇水平；将剩余108只小鼠平均分为未造模组与造模组，每组再分为VAN组、VAD组1、VAD组2,18只/组。造模组腹腔注射5%CCl₄ 10 mL/kg,2次/周，共8周。检测血清视黄醇、ALT/AST、肝脏指数；进行肝组织HE、Masson染色、纤维化程度评分和氧化应激水平检测。结果 饲养4周后，VAD组的血清视黄醇水平均低于VAN组，VAD组2更低（P<0.05）。CCl₄造模8周，肝脏指数及ALT/AST增高，肝脏表面有颗粒状突起，肝索结构紊乱、假小叶形成，可见大量蓝染纤维组织和纤维间隔；VAD组较VAN组更显著，但VAD组2肝脏坏死严重，假小叶纤维间隔处大量炎性细胞浸润，2只小鼠死亡。CCl₄停止给药，VAN造模组肝脏指数及ALT/AST基本恢复，肝索结构恢复正常，纤维化自发逆转；VAD造模组血清ALT/AST、肝脏大体及病理无明显变化，VAD组1仍可见肝索结构紊乱和假小叶，VAD组2腹腔黏连严重，仍可见假小叶及大量炎性细胞浸润，纤维化分期评分为3;CCl₄造模组（VAD组1）氧化损伤指标8-OHdG高于CCl₄造模组（VAN组）。结论 以含有500 U/kg VA的饲料饲喂小鼠4周，10 mL/kg CCl₄干预8周，可获得中重度的肝纤维化模型，成功率100%，停药8周无自发逆转，可建立一种稳定的肝纤维化动物模型。

关键词

维生素A缺乏 / 四氯化碳 / 慢性肝纤维化 / 动物模型