NEP1-40/PLGA对大鼠面神经损伤的修复效果研究

摘要

目的 探究神经生长抑制因子胞外肽残基1-40(neurite outgrowth inhibitor extracellular peptide residues 1-40,NEP1-40)联合聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]明胶电纺纤维膜对大鼠面神经损伤修复的影响。方法 获得单位实验动物伦理委员会的批准，按照随机分组原则将108只雄性SD大鼠分为4组，每组27只。即假手术组、对照组、PLGA组、NEP1-40+PLGA组。除假手术组外，其余组均建立面神经断裂后缝合损伤模型，对照组不作进一步处理，PLGA组采用PLGA膜包裹支持，NEP1-40+PLGA组在采用PLGA膜包裹支持基础上即刻局部注射NEP1-40(5μg/μL)10μL，单次。实验采用面神经功能检查、电生理学检测、透射电镜观察、HE染色、免疫组织化学染色髓鞘标记物S100β和轴突标记物β3-tubulin，在术后2、4、8周对大鼠损伤面神经的恢复情况进行评估。结果 8周时面神经功能评分NEP1-40+PLGA组优于对照组和PLGA组（P <0.001），面神经功能得到明显恢复；电生理检测受损面神经损伤处神经动作电位NEP1-40+PLGA组波幅高于对照组和PLGA组（P <0.001），但动作电位潜伏期与传导速度结果各组间无明显差距（P> 0.05）。2、4、8周时透射电镜观察面神经损伤处横截面有髓神经纤维数目和髓鞘厚度NEP1-40+PLGA组高于其他组（P <0.05）;HE染色观察到8周时对照组面神经部分恢复但整体观细胞分布不均且与周围组织界限略显模糊，NEP1-40+PLGA组细胞分布相对较为均匀，与周围组织分界较为清晰。2、4、8周时免疫组化结果显示面神经损伤处横截面NEP1-40提高了神经标记物S100β和β3-tubulin的表达，尤其是β3-tubulin已接近正常水平（P> 0.05）。结论 NEP1-40有利于损伤部位新生髓鞘及轴突的生成，在一定程度上能够促进受损面神经修复再生，加速损伤神经功能的恢复。

关键词

面神经 / 周围神经 / 神经损伤 / 神经再生 / 神经修复 / 神经生长抑制因子 / 神经生长抑制因子受体 / 神经生长抑制因子胞外肽残基1-40 / 聚乳酸-羟基乙酸共聚物 / 轴突再生

基金资助

黑龙江省自然科学基金重点项目（ZD2019H002）; 黑龙江省省属本科中央支持地方高校改革发展项目（PLP1点突变对神经系统疾病发生的影响及机制）