基于网络药理学、分子对接探讨异鼠李素治疗对口腔鳞状细胞癌的抑制作用及机制

摘要

目的 采用网络药理学和分子对接方法，分析异鼠李素（isorhamnetin,Iso）对口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）的作用及机制并进行体外实验验证。方法 将Iso-OSCC共同交集靶点进行PPI蛋白互作网络构建后获取关键靶点。同时将交集靶点进行靶点基因本体（gene ontology,GO）和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopediaof genes and genomes,KEGG）富集分析相关信号通路；将Iso与关键靶点以分子对接形式呈现。结合平板克隆形成实验、Transwell实验检测Iso处理Cal-27细胞后对细胞增殖和侵袭能力的影响。Western blot实验分析不同浓度Iso对雌激素受体-1(estrogen receptor-1,ESR1)、磷酸肌醇-3-激酶调节亚基1(phosphoinositide-3-kinase regulatory subunit1,PIK3R1)、Src酪氨酸激酶（Src tyrosine kinase,SRC）核心靶点蛋白及磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路蛋白的调控作用。结果 共得到269个Iso调控OSCC的潜在交集靶点，根据拓扑分析degree值筛选出PIK3R1、AKT1、SRC、ESR1等多个核心靶点。KEGG结果显示，Iso-OSCC交集靶点共富集165条信号通路，其中显示PI3K/AKT信号通路在Iso治疗OSCC的过程中具有重要影响。分子对接结果显示，靶蛋白PIK3R1、AKT1、SRC、ESR1与Iso结合能绝对值较高。Iso处理Cal-27细胞后，细胞集落形成数、穿膜细胞数及PIK3R1、ESR1、SRC、p-PI3K、pAKT蛋白表达水平随Iso浓度的升高而下降（P <0.05）。结论 Iso可通过抑制PI3K/AKT信号传导，影响PIK3R1、AKT1、SRC、ESR1蛋白表达，进而抑制OSCC发生发展。

关键词

异鼠李素 / 口腔鳞状细胞癌 / PI3K/AKT信号通路 / Src酪氨酸激酶 / 雌激素受体-1 / 网络药理学 / 分子对接 / 体外实验验证