白藜芦醇通过抑制MAPKs/NF-κB信号通路治疗小鼠种植体周围炎

摘要

目的 研究白藜芦醇（resveratrol,RSV）对丝线结扎诱导的实验性小鼠种植体周围炎（peri-implantitis,PI）的保护作用及其作用机制。方法 本研究已通过单位伦理委员会审查批准。拔除40只C57BL/6小鼠右侧上颌磨牙待自然愈合8周后在第一磨牙位点植入种植体；随机将小鼠分为对照组、小鼠种植体周围炎模型组、20 mg/kg白藜芦醇低剂量组（RSV-L）和40 mg/kg白藜芦醇高剂量组（RSV-H），植入种植体4周后，除对照组外其它小鼠建立丝线结扎诱导的种植体周围炎模型，其中模型组予以生理盐水灌胃干预，药物组用白藜芦醇灌胃干预，连续6周。观察种植体周围牙龈的水肿情况，显微CT测量小鼠种植体周围骨吸收情况；酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测龈沟液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量；HE染色观察小鼠种植体周围组织炎性细胞浸润情况；蛋白印迹法（Western blot,WB）检测牙龈组织中细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases,ERK）、p-ERK、c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）、p-JNK、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen activated protein kinase,p38 MAPK）、p-p38MAPK、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)、p-NF-κB、核因子-κB抑制蛋白（nuclear factor-κB inhibitory protein,IκΒα）、p-IκBα等蛋白表达水平及蛋白磷酸化情况。结果 对照组、白藜芦醇低剂量组和高剂量组治疗效果与模型组相比，组织水肿减轻，牙槽骨吸收减少，其中白藜芦醇高剂量组与低剂量组相比，组织水肿更轻，骨吸收更少；显微CT结果显示，模型组小鼠在近中、远中、颊侧和腭侧向4个位点均可观察到种植体周围骨水平发生显著的改变，高剂量白藜芦醇干预后可以减少牙槽骨的吸收（P<0.05）；与低剂量相比，高剂量组骨吸收在腭侧吸收减少（P<0.05），在近中、远中和颊侧吸收差异不显著（P>0.05）;ELISA结果显示，与模型组比较，白藜芦醇低剂量组、白藜芦醇高剂量组小鼠龈沟液中TNF-α、IL-6的水平较低（P<0.05），白藜芦醇高剂量组小鼠龈沟液中IL-6低于低剂量组（P<0.05），但TNF-α含量两组差异不显著；HE染色显示白藜芦醇治疗后小鼠炎性细胞浸润减少；WB结果显示，与对照组比较，模型组小鼠牙龈组织的p-Erk、p-JNK、p-p38MAPK、p-IκΒα和p-NF-κB磷酸化蛋白表达水平显著升高（P<0.01），白藜芦醇处理组显著抑制p-Erk、p-JNK、p-p38MAPK、p-IκΒα和p-NF-κB等蛋白的磷酸化，高剂量组与低剂量组相比，抑制MAPKs/NF-κB信号通路相关蛋白的磷酸化更显著（P<0.05）。结论 白藜芦醇可缓解丝线结扎诱导的实验性小鼠种植体周围炎，其机制可能是通过抑制MAPKs/NF-κB信号通路相关蛋白磷酸化。

关键词

种植体周围炎 / 白藜芦醇 / 动物模型 / p38丝裂原活化蛋白激酶 / 核因子κB