干细胞因子促进共培养DPSCs与HUVECs的成血管能力

摘要

目的 探讨干细胞因子（stem cell factor,SCF）对共培养的牙髓干细胞（dental pulp stem cells,DPSCs）和人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）成血管能力的影响。方法 本实验研究已通过单位伦理委员会审查批准。实验分为HUVECs组、SCF+HUVECs组、DPSCs+HUVECs组、SCF+DPSCs+HUVECs组。将SCF与培养液混合，制备成SCF浓度为100 ng/mL的混合培养液，按1∶5的比例将DPSCs和HUVECs在体外进行共培养。通过CCK-8增殖实验观察每组细胞在第1、3、5、7天的增殖能力，细胞划痕实验和Transwell迁移实验分别检测SCF对直接或间接共培养条件下细胞迁移的影响，采用基质胶管形成实验检测各组细胞血管生成能力，通过ELISA检测每组细胞培养上清液中血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)的浓度，Western blot检测CD31、CD34和VEGFA的蛋白表达水平。结果 细胞划痕实验和Transwell迁移实验结果表明SCF显著促进了DPSCs和HUVECs共培养组细胞的迁移（P<0.05)；体外基质胶管形成实验显示，SCF+DPSCs+HUVECs组中管状结构的分支数目和分支总长度显著高于其他组（P<0.05），并且该组中成血管相关蛋白CD31、CD34和VEGFA的表达水平较高（P<0.01)。结论 SCF能够增强共培养DPSCs和HUVECs的迁移能力和体外成血管能力。

关键词

牙髓再生 / 血管生成 / 干细胞因子 / 生长因子 / 牙髓干细胞 / 人脐静脉内皮细胞 / 共培养 / 组织工程