Box-Benhnken响应面法优化白及愈伤组织的增殖培养基配方

摘要

为了提高白及组培过程中愈伤的增殖系数,以白及种子为外植体,利用响应面法对诱导愈伤的增殖培养基中的激素水平进行优化。在添加不同浓度的6-BA(6-苄氨基嘌呤)和2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)的正交试验诱导愈伤基础上,根据BoxBenhnken(BBD)试验设计原理,采用三因素三水平的方法对3个激素的不同浓度水平进行组合实验。结果显示,通过回归模型分析获得增殖诱导的最佳培养基为MS+0. 801 mg/L 6-BA(6-苄氨基嘌呤)+1. 192 mg/L 2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)+0. 724 mg/L NAA(萘乙酸)。以优化后培养基进行愈伤组织继代发现其增殖系数为6. 154 2,为理论预测值的99. 74%。利用响应面法对愈伤组织增殖培养基进行优化,为以愈伤组织为研究材料的细胞悬浮培养、遗传转化、种苗快繁等研究奠定了基础。

关键词

白及 / 愈伤组织 / 增殖 / 培养基配方 / Box-Benhnken(BBD)响应面法