青钱柳功能性多糖的研究现状及展望

A review on recent research progress and future perspectives of polysaccharides from Cyclocaryae Folium

摘要

青钱柳叶是一种古老茶饮，也是国家卫健委认定的新食品原料。青钱柳多糖是其主要活性成分之一，具有降血糖、降血脂、抗氧化、免疫调节等多种功能，在食品、医药和生物医学等领域应用市场潜力巨大。通过综述国内外相关研究文献报道，对青钱柳叶所含功能性多糖的提取工艺、结构特征、药理活性及开发应用的研究现状进行较系统的归纳和分析，并对青钱柳多糖未来研究方向作了展望，拟为开发高活性青钱柳多糖保健食品或药物提供理论依据及研究支撑。

Abstract

Cyclocaryae Folium is the dry leaf of Cyclocarya paliurus （Batai.） Iljinskaja， which has been approved as a new food raw material by National Health Commission of People's Republic of China. With great beneficial to people’s health， it has also been used as a folk medicine for treatment of diabetes， hypertension and hyperlipidemia， etc. In recent years， polysaccharides from Cyclocaryae Folium （PCP） have attracted extensive attention in the food， pharmaceutical and biomedical fields due to their broad bioactivities， such as hpyerglycemic， hypolipidemic， antioxidative and immuno⁃ regulation effects. In this paper， the extraction， structural characterization， bioactivities and application of PCPF in recent years are summarized， and the further research trend is proposed， which is expected to provide a theoritical basis for the exploitation of functional food or medicines of highly active PCP.

Graphical abstract

关键词

青钱柳多糖 / 提取工艺 / 结构表征 / 药理活性 / 研究进展

Key words

polysaccharide from Cyclocaryae Folium / extraction technology / structural characterization / pharmacological activity / research progress

0 引 言

青钱柳（Cyclocarya paliurus （Batal.） Iljin.）属胡桃科（Juglandaceae）青钱柳属（Cyclocarya）落叶乔木，又名摇钱树、甜茶树等，是我国特有的单种属乔木植物，主要分布于长江以南各省区。其嫩叶可泡制成茶，具有清热解毒、生津止渴、降压强心，延年益寿等作用^［1］。基于其悠久的历史和广泛的应用基础，以及良好的保健价值和安全性，青钱柳叶于2013年被国家卫健委（原国家卫计委）列入新资源食品目录，极具应用开发潜力。近年来，国内外学者对青钱柳叶化学成分的研究表明，青钱柳叶中主要含多糖^［2，3］、黄酮类^［4］、三萜类^［5］等。其中青钱柳多糖作为其主要功能性成分之一，以其广泛的生物活性，深受科研工作者的关注。由于多糖类物质本身属于生物大分子，其纯化和制备工艺、结构解析等研究，较黄酮、三萜等小分子化合物更加困难，加上目前对于青钱柳多糖在构效关系、质量控制、产品工艺等方面的研究尚不够深入，导致其应用开发受限。对此，借鉴国内外研究同类课题的基本思路深入开展青钱柳应用研究具有重要意义。

众所周知，植物来源的多糖，其中不少具有显著生物活性，如临床上用于消化道肿瘤的放、化疗辅助药香菇多糖^［6］，用于乙型肝炎辅助治疗的猪苓多糖^［7］等。这些由植物细胞代谢产生的、具有某种特殊生物活性的多糖类天然产物可称之植物功能性多糖或者植物活性多糖，区别于植物多糖中的淀粉、糖原为植物储存能量的主要物质。近几十年来，植物功能性多糖一直是天然药物研究的热点，其研究范围涉及多糖植物资源、分离纯化、结构特性、理化性质、生物学性能以及开发应用等。研究表明，不同植物来源的多糖呈现化学结构特异性和多样性，并且多糖的化学结构对其活性具有决定性作用。例如，香菇中的β⁃葡聚糖（lentinan），其结构主要是以D⁃葡萄糖通过β1→3苷键缩合而成，可通过TLR4/Dectin1/MAPK、Syk/PKC/NF⁃κB等多种信号通路调控免疫细胞功能，发挥抗肿瘤作用^［6］；而人参多糖中的糖醛酸含量以及主链结构中的α⁃（1→4）⁃GalpA和α⁃（1→4）⁃Galp糖苷键构型，对其发挥抗炎和抗病毒作用具有重要意义^［8］。不难看出，植物功能性多糖的生物活性、化学结构以及构效关系研究，是多糖研究的前沿阵地，相关的研究进展对于这类多糖的应用开发具有重要推动作用。正如β⁃葡聚糖早已被广泛应用于各种消化道肿瘤、妇科肿瘤等临床治疗，而人参多糖则被开发成为注射液剂型，临床上用于减轻肿瘤放化疗引起的副作用。另外，在最新的中药防治新冠肺炎（COVID⁃19）的药理依据中，提及当归多糖、石斛多糖、黄芪多糖等十余种植物多糖，以其各自独特化学结构，显著抗肺纤维化作用，和/或免疫调节、抗病毒作用和良好安全性，有望成为COVID⁃19潜在治疗药物^［9，10］。除了上述医药用途，尚有更多植物多糖因其在调节肠道菌群结构和功能上发挥的作用^{［11，12］}，成为当今功能食品领域的研究热点，使它们在保健食品行业具有良好出路。

近年来，在“健康中国”的大背景下，本研究团队立足于三峡区域丰富的可食和药用植物资源，积极开展药食同源大健康产品开发利用研究。笔者深入湖北五峰、鹤峰、宣恩、咸丰等山区以及宜昌周边山地丘陵区开展植物资源调查，发现青钱柳作为一种国家卫健委批准的新食品原料，在该区域内野生资源储量较高，人工栽培正在建立和扩大，可保证其可持续开发利用。青钱柳中的小分子化学成分及其生物活性研究已比较深入，而多糖这类生物大分子的应用基础研究较为薄弱，加上国际公认植物多糖具有安全性较高的优点，系统整理并考虑加强青钱柳功能性多糖关于提取分离、结构表征、活性评价等方面的应用基础研究，对其开发研究显得尤其重要。

鉴于此，笔者以“青钱柳、Cyclocarya paliurus、青钱柳多糖、Cyclocarya paliurus and polysaccharide”等为检索词，检索中国学术期刊全文数据库（CNKI）、中国生物医学文献数据库（CBM）、维普中文期刊服务平台、万方学位论文库、Web of Science数据库（WoS）、美国国立医学图书馆生物医学信息数据库（Medline via PubMed），以及国家知识产权局中国专利公布公告查询系统、中国专利全文数据库（知网版）、药智网数据库等，对所得文献数据（不包括青钱柳多糖衍生物），按照植物功能性多糖研究通常涉及的研究范围进行分类，筛选抽提文献信息并整理成文，以期为今后青钱柳多糖的深度应用开发提供参考。

1 青钱柳多糖提取工艺方法

青钱柳叶中的多糖往往伴同黄酮类、三萜类以及色素等其他成分，故在提取多糖时，需要考虑青钱柳多糖及共存成分的性质，同时兼顾考虑提取有效性、安全性、经济性等因素，以及考虑是否影响多糖活性，是否有利于后续的分离精制等。近些年来，国内外学者深入研究了青钱柳多糖的各种提取方法。适当的提取方法不仅可以提高多糖得率，还可提高其生物活性，因而有必要了解不同提取方法对青钱柳多糖性质的影响。依据近年来国内外相关文献报道，总结、归纳了目前应用于青钱柳多糖的多种提取工艺，见表1^［13~25］。

上述各种青钱柳多糖的提取工艺方法在高效性、经济性、安全性、环保等方面各具优势，但也存在一定局限性。通过各种方法提取得到的青钱柳粗多糖，通常还伴有植物蛋白、色素等杂质，有必要对其进行蛋白和色素脱除处理，以及采用透析法、柱层析法、超滤法等方法进行分离纯化。显然，青钱柳多糖的应用研究离不开提取分离技术，今后有关青钱柳多糖的提取工艺技术仍然需要在提高连续化生产能力，开发“集合了提取⁃分离⁃纯化⁃浓缩等操作”的集成制造技术装备，以及开发数字化和智能化装备等领域内努力发展。

2 青钱柳多糖结构特性

随着关于青钱柳多糖的糖链结构与生物功能的研究越来越多，对其结构的解析成为进一步研究多糖理化性质、构效关系、体内代谢、临床应用等方面的重要基础，主要包括分子量分布、单糖的组成与比例、单糖的构型、糖与糖的连接位置和顺序等。

多项研究表明，从青钱柳叶提取分离得到的多种多糖组分，主要由半乳糖醛酸（GalA）、半乳糖（Gal）、葡萄糖（Glu）、阿拉伯糖（Ara）、鼠李糖（Rha）、甘露糖（Man）、木糖（Xyl）和核糖（Rib）等单糖组成^{［2，26，27］}。虽然单糖种类类似，但由于原料来源和制备方法的不同，各种多糖组分的平均分子量和单糖比例存在明显差异。其中，单糖组成中以GalA、Gal、Ara和Glu的比例较高。除此之外，有研究还报道了一种青钱柳多糖CP50，其单糖组成中存在半乳糖醛酸（GalA）和葡萄糖醛酸（GlcA），摩尔分数分别为29.1%和2.6%^［28］。在单糖构型与糖链结构片段的分析中，前述CP50的糖链结构以1，4⁃连接为主，α⁃D⁃Gal _p A通过1，4糖苷键连接构成多糖的同聚半乳糖醛酸区，β⁃D⁃Gal _p 通过1，4糖苷键连接构成多糖的I型阿拉伯半乳聚糖侧链^［28］。有研究分析了另一种青钱柳多糖，其主链结构包含→4） GalA _p （α1 → 和→2） Rha _p （α1 → 4） GalA _p （α1→的重复片段，在主链→2） Rha _p （α1 → 残基O⁃4位上部分存在→4） Gal _p （β1 → 和→5） Ara _f （α1 → 交替重复的支链片段，以及在主链→5） Ara _f （α1 → 残基O⁃3位上部分存在→3） Ara _f （α1→结构分支^［29］。此外，在主链非还原端→4） Gal _p （β1 →偶尔连接→5） Ara _f （α1 →片段，并且在部分的主链非还原端→4） Gal _p （β1 →残基O⁃3位上连接一种由→6） Hex _p （β1 →和半乳糖醛酸酯或甲基半乳糖醛酸构成的分支结构，另外在部分→4） GalA _p （β1 → 残基的O⁃3位还连接末端Xyl。最近，一种主链骨架结构为→4）⁃β⁃D⁃Glc⁃（1）₇ →（2）⁃β⁃D⁃Man⁃（1）₂ →4）⁃β⁃D⁃Ga的青钱柳多糖CPP⁃D被报道^［30］。

通过上述研究可以看出，青钱柳多糖是以α（1→4）糖苷键为主链的杂多糖，另外还包含α（1→2）、β（1→5）、β（1→3）和β（1→4）等多种糖苷键。通常，主链结构中GalA所占比例较大，表明青钱柳多糖主要是一种酸性多糖。在一些典型的植物多糖结构中，其主链2⁃O上有分枝，并且Gal单元在支链结构中所占比例较大^［29］（图1a）。这与目前常见的植物多糖如香菇多糖^［31］（图1b）、灵芝多糖^［32］（图1c）等结构（呈现β（1→3）连接的聚葡萄糖，并有1→6或1→4连接的支链）具有明显的区别。青钱柳多糖的这些结构特性对于深入探讨植物多糖结构多样性，以及多糖结构与功能的关系，具有重要意义，并且可能是今后青钱柳多糖开发应用的结构基础和亮点。

3 青钱柳多糖的生物活性

3.1 降糖作用

青钱柳叶作为代茶饮，茶汤甘甜滋润，生津止渴，民间素有“降血糖、降血压、延年益寿”等说法，被当地百姓称为甜茶、神茶。近年来研究发现，青钱柳叶所含多糖成分确有明显的降血糖作用。在体外实验中，研究者发现青钱柳多糖对α⁃葡萄糖苷酶具有较强抑制活性，且随着浓度的增加，抑制能力增强^［33］；在动物实验中，青钱柳多糖可以降低四氧嘧啶所致糖尿病小鼠的血糖值、胰岛素、胰高血糖素和C肽的含量^［34］，证实降血糖活性与提高糖尿病小鼠对葡萄糖、淀粉的耐受力，改善胰腺组织形态、保护胰岛细胞结构，抑制胰岛β细胞损伤密切相关^{［34，35］}。此外，青钱柳多糖对高脂饮食加链脲佐菌霉素（STZ）诱导的糖尿病小鼠具有较好的降血糖活性，并证实其作用机制与增强机体的免疫能力和抗氧化活性密切相关^［36］。同时研究发现，青钱柳多糖可增强H4IIE细胞活性，证实上调肝细胞胰岛素信号通路关键靶点InsR、IRS⁃2基因表达及InsR β、IRS⁃2、Akt蛋白磷酸化是其发挥降糖作用的机制之一^［37］。最近还有研究发现，青钱柳多糖的降糖作用机制还与其能够通过调节机体肠道微生物群，进而调控宿主营养与能量代谢密切相关^{［38，39］}。

3.2 降脂作用

当前由于饮食习惯和环境的改变，高血脂症的患者呈逐年上升趋势，所以开发降血脂的药物和食品迫在眉睫。在体外实验中，研究者发现青钱柳多糖可通过抑制脂肪酶活性而减少血液中的游离脂肪酸（FFA）的生成来发挥降脂作用^［40］。在体内实验中，青钱柳多糖可降低高脂饲料所致高血脂症模型大鼠或小鼠血液中甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量，增强超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH⁃Px）、过氧化氢酶（CAT）、总抗氧化能力活性，降低高脂血症大鼠或小鼠肝脏受损的程度，抑制体质量增加^［41］，并且证实其可以通过抑制大鼠或小鼠肝脏及脂肪组织中自杀相关因子（factors associated suicide， FAS）、过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）、葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）、脂肪甘油三酯脂肪酶（ATGL）的mRNA和蛋白表达，调控AMPK信号通路、脂肪酸生物合成通路、脂肪酸代谢通路和脂肪细胞因子信号通路等机制来发挥其降血脂作用^［42~44］。另外，以秀丽线虫（Caenorhabditis elegans）为模型考察青钱柳多糖的降脂作用，发现青钱柳多糖可明显降低线虫肠道中脂肪储量、脂滴大小以及脂滴密度，其机制与线虫能量代谢中核黄素基因vit⁃2表达升高时，脂肪代谢中通过调控mdt⁃15下调sbp⁃1和fat⁃6、fat⁃7基因表达，进而阻止Δ9⁃去饱和酶基因表达等相关^［45］。

3.3 抗氧化作用

植物多糖以其低毒、安全和良好的抗氧化活性广泛应用于食品和药品行业。在体外实验中，研究者发现青钱柳多糖可有效地清除DPPH∙、O₂^-∙、∙OH自由基^{［18，46］}。利用Fenton反应和自由基清除剂，证实青钱柳多糖对羟基自由基的清除率达到68.1%，对DPPH·的清除率可达到71.8%。在β⁃胡萝卜素⁃亚麻油酸实验中，通过抗氧化剂可以阻碍亚麻油酸酯自由基氧化β⁃胡萝卜素原理，在加入青钱柳多糖的体系中，青钱柳多糖表现出对β⁃胡萝卜素的保护作用^［47］。与此同时还发现，常规提取的多糖和超声提取的多糖在清除氧自由基、DPPH·、β⁃胡萝卜素⁃亚麻油酸实验中有显著性差异^［47］。在体内实验中，青钱柳多糖可减轻高脂血症小鼠血清和肝脏中SOD和GSH⁃Px活性，降低丙二醛和FFA的含量；减轻自发性小鼠肝组织及CCl₄、H₂O₂、Fe²⁺⁃Ｖ所致的肝脏脂质过氧化程度^［48］。上述实验表明青钱柳多糖在体内和体外都表现出了显著的抗氧化活性。

3.4 免疫调节作用

植物多糖的免疫调节作用是多糖的主要生物学活性之一。不同来源的植物多糖可从分子、细胞及器官水平发挥免疫调节作用，其抗肿瘤、抗氧化等药理学作用均与其免疫调节活性有关。研究发现青钱柳多糖可通过改变巨噬细胞的形态、增强巨噬细胞内酶活性以及促进巨噬细胞分泌细胞因子等途径增强其吞噬活性，从而进行免疫调节^［49］，亦可以显著提高脂多糖刺激RAW264.7细胞NO的释放量，刺激细胞因子TNF⁃α、IL⁃1β和PGE2的分泌，在一定程度能上调巨噬细胞iNOS、IFN⁃γ、IL⁃12和IL⁃18的表达^［50］。也有研究发现青钱柳多糖能显著促进树突状细胞MHC II类分子表达及树突状细胞的成熟，而树突细胞是体内最强大的抗原提呈细胞，能有效调节机体的免疫应答，进而刺激大量IL⁃8、IL⁃6、IL⁃10、IL⁃1β、TNF⁃α炎性因子分泌而发挥免疫调节作用^［51］。此外，在环磷酰胺致小鼠免疫功能低下的动物模型中，青钱柳多糖可明显提升模型小鼠的脾脏与胸腺指数，增强脾脏中SOD、T⁃AOC、GSH⁃Px以及CAT活性^［50］。上述研究提示青钱柳多糖可以通过激活免疫细胞、促进细胞因子的释放，促进免疫器官的生长及免疫球蛋白的分泌、抑制补体系统的过度激活等发挥免疫调节作用。

3.5 其他作用

研究发现青钱柳多糖可显著抑制人宫颈癌HeLa细胞^［2］、人胃癌MGC803细胞^［52］和甲状腺癌^［53］的生长、促进其细胞凋亡，并证实其作用机制是下调Akt、p⁃Akt、Bcl⁃2及上调Bax的表达来发挥抗肿瘤作用。研究也发现青钱柳多糖可明显抑制低氧状态人肺腺癌A549和肺癌H520细胞的存活率，联合X⁃光线照射后，能增强肿瘤细胞辐射敏感性，其作用机制与mTOR/Akt/PI3K信号通路抑制相关^［54］。有研究报道青钱柳多糖联合X⁃光照射，可有效抑制人结肠癌SW480细胞增殖并促进细胞凋亡，其机制也与PI3K/Akt信号通路抑制有关^［55］。也有研究表明青钱柳多糖对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大肠杆菌（Escherichia coli）、枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）、啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）、假丝酵母（Candida sp.）有抑制活性^［18］。通过强迫游泳试验和负重游泳实验表明青钱柳多糖可增加小鼠的游泳时间，增加血红蛋白和肝糖原含量，同时减少血清尿素氮和血乳酸的含量，表明青钱柳多糖具有显著的抗疲劳活性^［17］。此外，青钱柳多糖可通过skn⁃1和hsf⁃1激活抗逆基因（sod⁃3，sod⁃5，ctl⁃1，ctl⁃2，hsp⁃16.1，hsp⁃16.2）增强线虫的压力耐受能力^［25］。青钱柳多糖对STZ所致糖尿病大鼠肾脏损伤具有保护作用，其机制可能与增强肾脏抗氧化能力和减轻肾纤维化有关^［56］。青钱柳多糖通过其抗氧化性质，对CCl₄所致肝肾损伤小鼠肝脏和肾脏氧化应激状态具有改善作用^［57］；同时具有改善CCl₄诱导小鼠肝脏炎症反应，其机制与青钱柳多糖能有益调节肠道微生物群及肝细胞中TLR4/MAPK信号通路相关^［58］。

4 开发应用现状

相比起前述在提取工艺、结构特征以及生物活性等方面取得的研究进展，青钱柳多糖的开发应用目前尚处于探索与起步阶段。从中国临床试验注册中心（ChiCTR）检索得到2条青钱柳多糖相关的药品研发信息，均由湘南学院附属医院申办，主要是探讨青钱柳叶提取物所含多糖和黄酮对II⁃型糖尿病患者肠道菌群的影响。目前该临床试验正在进行中。青钱柳多糖固体饮料、青钱柳多糖泡腾片、青钱柳降血糖冲剂、苦瓜青钱柳降脂保健茶等少数几种含青钱柳功能性多糖的、主要用于降糖降脂和增强机体功能的专利保健产品被开发出来^［59~62］，但尚未发现市面上有销售。此外，两个团队分别报道了一种含青钱柳多糖的口服液制剂，但均未见上市^{［63，64］}。青钱柳多糖功能性产品还有待于进一步研发与推广。

5 总结与展望

青钱柳叶具有良好的食用和药用价值，然而目前对其研究还主要停留在粗产品水平阶段，其功能成分的研究还不够深入，精深加工产品仍属空白。青钱柳多糖作为青钱柳叶所含三大功能成分（黄酮、三萜和多糖）之一，根据上述文献报道可以看出，其化学结构特征明显，并且被证实具有多种确切的生物活性，尤其表现在降血糖、降血脂等功能。一方面，青钱柳多糖这些突出的生物活性与其应用历史和现状相一致，表明青钱柳多糖是其降血糖、降血脂作用的重要活性物质，值得深入开发研究；另一方面，青钱柳多糖的生物活性与其化学结构的特异性密切相关，表现出其与香菇多糖、灵芝多糖等显著的抗癌活性具有明显区别，更加偏向降血糖、降血脂、抗氧化等传统保健作用。这可能是青钱柳叶及其功能性多糖受到国内外研究人员广泛关注的重要原因。

近年来随着糖尿病、高脂血症等慢性健康问题日益严峻，青钱柳及其所含功能性多糖，可作为天然的降糖降脂的食品和保健品，在生物医药、食品工业等方面必将得到广泛应用。纵观青钱柳多糖的研究现状，由于多糖类物质研究一直存在着多糖一级和高级结构测定的难度和特殊性、构效关系的不确定性，以及多糖类成分质量不容易控制等问题，今后对青钱柳功能性多糖研究还有待深入，可以考虑从几个方面进行：（1）青钱柳多糖的高级结构、构效关系及其作用机制；（2）青钱柳多糖提取工艺的工业化推广以及相应产品质量标准的建立；（3）结合现有研究基础，加强食品和医药产品研究，满足保健食品和药品领域需求；（4）以结构相对明确、质量稳定可控的青钱柳多糖为基础，探索新的药理活性及其机制，或对其进行结构修饰，以微生物降解等方法制备寡糖等研究，开辟青钱柳多糖新的研究领域，促进青钱柳的深度开发和产业化发展。

参考文献

[1] 国家中医药管理局《中华本草》编委会. 中华本草[M]. 上海: 上海科学技术出版社, 1999: 370⁃371.

[2] State Administration of Traditional Chinese Medicine. Chinese herbal medicine [M]. Shanghai: Shanghai Science and Technology Press, 1999, 370⁃371.

[3] Xie J H, Liu X, Shen M Y, et al. Purification, physicochemical characterisation and anticancer activity of a polysaccharide from Cyclocarya paliurus leaves [J]. Food Chem, 2013, 136(3⁃4): 1453⁃1460.

[4] 谢建华. 青钱柳多糖的分离纯化与结构解析及其生物活性研究[D]. 南昌: 南昌大学, 2007: 60⁃78.

[5] Xie J H. Studies on the purification, structure and bioactivities of polysaccharides from Cyclocarya paliurus (Batal.) Iljinskaja [D]. Nanchang: Nanchang University, 2007: 60⁃78.

[6] Xie J H, Dong C J, Nie S P, et al. Extraction, chemical composition and antioxidant activity of flavonoids from Cyclocarya paliurus (Batal.) Iljinskaja leaves [J]. Food Chem, 2015, 186: 97⁃105.

[7] Wang Y R, Cui B S, Han S W, et al. New dammarane triterpenoid saponins from the leaves of Cyclocarya paliurus [J]. J Asian Nat Prod Res, 2018, 20(11): 1019⁃1027.

[8] Zhang M, Zhang Y R, Zhang L J, et al. Mushroom polysaccharide lentinan for treating different types of cancers: a review of 12 years clinical studies in China [M]//Progress in Molecular Biology and Translational Science. Amsterdam: Elsevier, 2019: 297⁃328.

[9] Bandara A R, Rapior S, Bhat D J, et al. Polyporus umbellatus, an edible⁃medicinal cultivated mushroom with multiple developed health⁃care products as food, medicine and cosmetics: a review [J]. Cryptogam Mycol, 2015, 36(1): 3⁃42.

[10] Ji X L, Hou C Y, Shi M M, et al. An insight into the research concerning Panax ginseng C. A. Meyer polysaccharides: a review [J]. Food Rev Int, 2020: 1⁃17.

[11] Chen R R, Li Y J, Chen J J, et al. A review for natural polysaccharides with anti⁃pulmonary fibrosis properties, which may benefit to patients infected by 2019⁃nCoV [J]. Carbohydr Polym, 2020, 247: 116740.

[12] Chen X Y, Han W W, Wang G X, et al. Application prospect of polysaccharides in the development of anti⁃novel coronavirus drugs and vaccines [J]. Int J Biol Macromol, 2020, 164: 331⁃343.

[13] 李茜,吴涛,刘锐,等.植物多糖与肠道菌群互作及其对代谢综合征的影响[J].食品安全质量检测学报, 2020, 11(21): 7649⁃7655.

[14] Li Q, Wu T, Liu R, et al. Interaction between plant polysaccharide⁃intestinal microbiota interaction and its effect on metabolic syndrome [J]. J Food Saf Qual, 2020, 11(21): 7649⁃7655.

[15] Yin C M, Noratto G D, Fan X Z, et al. The impact of mushroom polysaccharides on gut microbiota and its beneficial effects to host: a review [J]. Carbohydr Polym, 2020, 250: 116942.

[16] 谢建华,谢明勇,聂少平, 等. 青钱柳多糖提取工艺的研究[J]. 食品科学, 2007, 28(10): 188⁃191.

[17] Xie J H, Xie M Y, Nie S P, et al. Study on extraction technology of polysaccharides from Cyclocarya paliurus (Batal.) Iljinskaja [J]. Food Science, 2007, 28(10): 188⁃191.

[18] 吕素方, 魏慧珍, 张春来, 等. 响应面法优化青钱柳粗多糖提取工艺[J]. 江西中医药, 2016, 47(5): 62⁃64.

[19] Lü S F, Wei H Z, Zhang C L, et al. Optimization of extraction process for Cyclocarya paliurus (Batal.) Iljinskaja polysaccharide by using response surface methodology [J]. Jiangxi J Trad Chin Med, 2016, 47(5): 62⁃64.

[20] 邹荣灿. 青钱柳多糖提取工艺优化及其体外抗氧化、降血糖活性研究[D]. 贵阳: 贵州师范大学, 2018: 17⁃25.

[21] Zou R C. Extraction process optimization and antioxidant, hypoglycemic activity of polysaccharide from Cyclocarya paliurus [D]. Guiyang: Guizhou Normal University, 2018: 17⁃25.

[22] 上官新晨, 陈木森, 徐睿庸, 等. 超声波法提取青钱柳多糖[J]. 江西农业大学学报, 2006, 28(6): 809⁃812.

[23] Shangguan X C, Chen M S, Xu R Y, et al. Ultrasonic extraction of polysaccharide from Cyclocarya paliurus (Batal.) Iljinskaja [J]. Acta Agri Univ Jiangxiensis, 2006, 28(6): 809⁃812.

[24] Li C. Extraction and anti⁃fatigue activity of polysaccharides from Cyclocarya paliurus (Batal.) Iljinskaja [J]. Appl Mech Mater, 2013, 295⁃298: 293⁃297.

[25] Xie J H, Shen M Y, Xie M Y, et al. Ultrasonic⁃assisted extraction, antimicrobial and antioxidant activity of Cyclocarya paliurus (Batal.) Iljinskaja polysaccharides [J]. Carbohydr Polym, 2012, 89(1): 177⁃184.

[26] 胡文兵,杨占威,陈慧,等. Plackett⁃Burman和Box⁃Behnken试验设计优化超声波⁃酶法提取青钱柳多糖工艺及结构初探[J]. 天然产物研究与开发, 2017, 29(4): 671⁃679.

[27] Hu W B, Yang Z W, Chen H, et al. Optimization of ultrasonic and enzyme⁃assisted extraction of polysaccharides from Cyclocarya paliurus by Plackett⁃Burman and Box⁃Behnken experiment and analysis of its structure [J]. Nat Prod Res Dev, 2017, 29(4): 671⁃679.

[28] 上官新晨,陈木森,蒋艳,等. 微波提取青钱柳多糖的研究[J].食品与生物技术学报, 2007, 26(5): 6⁃9.

[29] Shangguan X C, Chen M S, Jiang Y, et al. Microwave⁃assisted extraction of polysaccharide from Cyclocarya paliurus (Batal.) Ijinskaja [J]. J Food Sci Biotechnol, 2007, 26(5): 6⁃9.

[30] Xie J H, Xie M Y, Shen M Y, et al. Optimisation of microwave⁃assisted extraction of polysaccharides from Cyclocarya paliurus (Batal.) Iljinskaja using response surface methodology [J]. J Sci Food Agr, 2010, 90(8): 1353⁃1360.

[31] 应瑞峰,黄梅桂,王耀松,等. 超声波微波协同提取青钱柳超微粉多糖及活性研究[J]. 食品研究与开发, 2017, 38(23): 32⁃37.

[32] Ying R F, Huang M G, Wang Y S, et al. Ultrasonic⁃microwave synergistic extraction and activity of polysaccharides from Cyclocarya paliurus [J]. Food Res Dev, 2017, 38(23): 32⁃37.

[33] 李彦坡,邹盈,李群和,等. 超高压提取青钱柳多糖条件优化及抗氧化活性[J]. 食品工业, 2020, 41(3): 5⁃9.

[34] Li Y P, Zou Y, Li Q H, et al. Optimization of ultra⁃high pressure extraction process from Cyclocarya paliurus polysaccharide and its antioxidant activity [J]. The Food Industry, 2020, 41(3): 5⁃9.

[35] 鲁青,严美婷,张超凤,等. 微生物发酵技术同步提取青钱柳多糖和黄酮[J]. 食品与发酵工业, 2019, 45(11): 113⁃117.

[36] Lu Q, Yan M T, Zhang C F, et al. Synchronous extraction of Cyclocarya paliurus polysaccharides and flavonoids by microbial fermentation [J]. Food Ferment Ind, 2019, 45(11): 113⁃117.

[37] Lin C, Su Z, Luo J, et al. Polysaccharide extracted from the leaves of Cyclocarya paliurus (Batal.) Iljinskaja enhanced stress resistance in Caenorhabditis elegans via skn⁃1 and hsf⁃1 [J]. Int J Biol Macromol, 2020, 143: 243⁃254.

[38] Xie J H, Shen M Y, Nie S P, et al. Separation of water⁃soluble polysaccharides from Cyclocarya paliurus by ultrafiltration process [J]. Carbohyd Polym, 2014, 101: 479⁃483.

[39] 蒋向辉,蒋天智,王翔,等.青钱柳叶多糖中单糖组分分析[J]. 广西师范大学学报(自然科学版), 2018, 36(2): 87⁃93.

[40] Jiang X H, Jiang T Z, Wang X, et al. Monosaccharide constituents of the polysaccharides from the leaf of Cyclocarya paliurus [J]. J Guangxi Norm Univ: Nat Sci Ed, 2018, 36(2): 87⁃93.

[41] 王小江,单鑫迪,胡明华,等. 青钱柳叶多糖的结构表征及其抑制α⁃葡萄糖苷酶活性研究[J]. 中草药, 2017, 48(8): 1524⁃1528.

[42] Wang X J, Shan X D, Hu M H, et al. Structural characterization of polysaccharide from Cyclocarya paliurus leaves and its α⁃glucosidase inhibitory effect [J]. Chin Trad Herb Drugs, 2017, 48(8): 1524⁃1528.

[43] Wang X, Zhao X, Lü Y, et al. Extraction, isolation and structural characterization of a novel polysaccharide from Cyclocarya paliurus [J], Int J Biol Macromol, 2019, 132: 864⁃870.

[44] An Q, Ye X, Han Y, et al. Structure analysis of polysaccharides purified from Cyclocarya paliurus with DEAE⁃cellulose and its antioxidant activity in RAW264.7 cells [J]. Int J Biol Macromol, 2020, 157: 604⁃615.

[45] Zhang Y Y, Xu X J, Zhang L N. Gel formation and low⁃temperature intramolecular conformation transition of a triple⁃helical polysaccharide lentinan in water [J]. Biopolymers, 2008, 89(10): 852⁃861.

[46] Ye L, Li J, Zhang J, et al. NMR characterization for polysaccharide moiety of a glycopeptide [J]. Fitoterapia, 2010, 81(2): 93⁃96.

[47] 邹荣灿,吴少锦,焦思棋,等. 不同产地青钱柳多糖的体外抗氧化及α⁃葡萄糖苷酶抑制活性[J]. 食品工业科技, 2018, 39(22): 25⁃29.

[48] Zou R C, Wu S J, Jiao S Q, et al. Antioxidant activity and α⁃glucosidase inhibitory activity of Cyclocarya paliurus polysaccharides from different regions [J]. Sci Technol Food Ind, 2018, 39(22): 25⁃29.

[49] 施利仙,上官新晨,王文君,等. 青钱柳多糖对四氧嘧啶糖尿病小鼠的降血糖作用[J]. 营养学报, 2009, 31(3): 263⁃266.

[50] Shi L X, Shangguan X C, Wang W J, et al. Effects of polysaccharide of Cyclocarya paliurus on alloxan⁃induced diabetic mice [J]. Acta Nutr Sin, 2009, 31(3): 263⁃266.

[51] 张小芳,段小群,卢曦,等. 青钱柳多糖对糖尿病小鼠血糖水平和胰腺组织形态的影响[J]. 华夏医学, 2010, 23(1): 15⁃17.

[52] Zhang X F, Duan X Q, Lu X, et al. The effect of Cyclocarya paliurus polysaccharide (CP) on blood glucose and histomorphology of pancreas in diabetic mice [J]. Acta Medicinae Sinica, 2010, 23(1): 15⁃17.

[53] 姜霞, 罗丹, 谭开祥, 等.富硒青钱柳多糖对糖尿病模型小鼠降血糖研究[J]. 中医药导报, 2018, 24(17): 66⁃69.

[54] Jiang X, Luo D, Tan K X, et al. Study of selenium polysaccharide from Cyclocarya paliurus (Batal ) Ijinskaja in blood glucose of diabetic mice [J]. Guid J Tradit Chin Med Pharm, 2018, 24(17): 66⁃69.

[55] 许光远, 孙文, 郭璇, 等. 青钱柳多糖对H4IIE肝细胞胰岛素信号传递的影响[J]. 世界科学技术: 中医药现代化, 2016, 18(7): 1144⁃1148.

[56] Xu G Y, Sun W, Guo X, et al. Impacts of Cyclocarya paliurus polysaccharide on insulin signaling pathway in H4IIE liver cells [J]. World Sci Technol Mod Tradit Chin Med Mater Med, 2016, 18(7): 1144⁃1148.

[57] Yao Y, Yan L, Chen H, et al. Cyclocarya paliurus polysaccharides alleviate type 2 diabetic symptoms by modulating gut microbiota and short⁃chain fatty acids [J]. Phytomedicine, 2020, 77: 153268.

[58] Li Q, Hu J, Nie Q, et al. Hypoglycemic mechanism of polysaccharide from Cyclocarya paliurus leaves in type 2 diabetic rats by gut microbiota and host metabolism alteration [J]. Sci China Life sci, 2021, 64(1): 117⁃132.

[59] 黄明圈,上官新晨,徐明生,等.青钱柳多糖降血脂作用的研究[J]. 江西农业大学学报, 2011, 33(1): 157⁃161.

[60] Huang M Q, Shangguan X C, Xu M S, et al. Studies on hypolipemic effect of Cyclocarya paliurus (Batal.) ijinskaja polysaccharide [J]. Acta Agric Univ Jiangxiensis, 2011, 33(1): 157⁃161.

[61] 叶振南,李楠,盛丹丹,等. 青钱柳多糖对高脂血症大鼠血脂及抗脂质过氧化作用的影响[J]. 现代食品科技, 2014, 30(4): 1⁃5, 20.

[62] Ye Z N, Li N, Sheng D D, et al. Effect of Cyclocarya paliurus polysaccharide on hyperlipidemia and anti⁃lipid peroxidation in hyperlipidemic rats [J]. Mod Food Sci Tech, 2014, 30(4): 1⁃5, 20.

[63] 李楠,赵静,吴茹,等. 青钱柳多糖对高脂血症小鼠脂代谢及PPARγ, ATGL基因mRNA表达的影响[J]. 中国食品学报, 2015, 15(9): 9⁃14.

[64] Li N, Zhao J, Wu R, et al. Research on the influence of Cyclocarya paliurus (Batal.) Iljinskaja polysaccharide on PPARγ and ATGL gene expression in hyperlipoidemia mice [J]. J Chin Inst Food Sci Technol, 2015, 15(9): 9⁃14.

[65] Yang Z, Wang J, Li J, et al. Antihyperlipidemic and hepatoprotective activities of polysaccharide fraction from Cyclocarya paliurus in high⁃fat emulsion⁃induced hyperlipidaemic mice [J]. Carbohydr Polym, 2018, 183: 11⁃20.

[66] Yang Z, Zhao J, Wang J, et al. Effects of Cyclocarya paliurus polysaccharide on lipid metabolism⁃related genes DNA methylation in rats [J]. Int J Biol Macromol, 2019, 123: 343⁃349.

[67] Lin C X, Lin Y Z, Meng T M, et al. Anti⁃fat effect and mechanism of polysaccharide⁃enriched extract from Cyclocarya paliurus (Batal.) Iljinskaja in Caenorhabditis elegans [J]. Food Funct, 2020, 11(6): 5320⁃5332.

[68] 葛霞,陈婷婷,蔡教英,等.青钱柳多糖抗氧化活性的研究[J]. 中国食品学报, 2011, 11(5): 59⁃64.

[69] Ge X, Chen T T, Cai J Y, et al. Studies on the anti⁃oxidant activity of polysaccharide from Cyclocarya paliurus (Batal.) iljinsk [J]. J Chin Inst Food Sci Technol, 2011, 11(5): 59⁃64.

[70] Tang W, Lin L H, Xie J H, et al. Effect of ultrasonic treatment on the physicochemical properties and antioxidant activities of polysaccharide from Cyclocarya paliurus [J]. Carbohydr Polym, 2016, 151: 305⁃312.

[71] 段小群,张小芳,卢曦,等. 青钱柳多糖体外抗脂质过氧化作用研究[J]. 中药材, 2010, 33(10): 1618⁃1621.

[72] Duan X Q, Zhang X F, Lu X, et al. Effect of Cyclocarya paliurus polysaccharides on lipid peroxidation in vitro [J]. Chin Med Mat, 2010, 33(10): 1618⁃1621.

[73] Xiong L, Ouyang K H, Jiang Y, et al. Chemical composition of Cyclocarya paliurus polysaccharide and inflammatory effects in lipopolysaccharide⁃stimulated RAW264.7 macrophage [J]. Int J Biol Macromol, 2018, 107(Pt B): 1898⁃1907.

[74] Xiong L, Ouyang K H, Chen H, et al. Immunomodulatory effect of Cyclocarya paliurus polysaccharide in cyclophosphamide induced immunocompromised mice [J]. Bioact Carbohydrates Diet Fibre, 2020, 24: 100224.

[75] 黄丹菲,聂少平,谢建华,等. 青钱柳多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞表面分子表达的影响[J]. 天然产物研究与开发, 2009, 21(5): 771⁃775.

[76] Huang D F, Nie S P, Xie J H, et al. Effect of Cyclocarya paliurus (Batal.) polysaccharides on the surface molecule expression level of dendritic cells [J]. Nat Prod Res Dev, 2009, 21(5): 771⁃775.

[77] 韩澄,聂少平,黄丹菲,等. 青钱柳多糖对人胃癌MGC_803细胞生长的影响[J]. 天然产物研究与开发, 2009, 21(6): 952⁃955.

[78] Han C, Nie S P, Huang D F, et al.Effects of polysaccharides from Cyclocarya paliurus (Batal.) Iljinskjk on growth of MGC803 cells [J]. Nat Prod Res Dev, 2009, 21(6): 952⁃955.

[79] He Z W, Lv F, Gan Y L, et al. Anticancer effects of Cyclocarya paliurus polysaccharide (CPP) on thyroid carcinoma in vitro and in vivo [J]. Int J Polym Sci, 2018, 2018: 1⁃7.

[80] Zhang F M, Fan B, Mao L J. Radiosensitizing effects of Cyclocarya paliurus polysaccharide on hypoxic A549 and H520 human non⁃small cell lung carcinoma cells [J]. Int J Mol Med, 2019, 44(4): 1233⁃1242.

[81] Jin Y J, Jin Z Z, Jiang S Y. Antiproliferative and pro⁃apoptotic effects of Cyclocarya paliurus polysaccharide and X⁃ray irradiation combination on SW480 colorectal cancer cells [J]. Mol Med Rep, 2019, 20(4): 3535⁃3542.

[82] 华春秀.青钱柳多糖对糖尿病大鼠肾脏损伤保护作用的研究[J].中医临床研究, 2020, 12(28): 6⁃10.

[83] Hua C X. A study on protecting⁃role of Cyclocarya paliurus polysaccharides on the kidney injury of diabetic rats[J]. Clin J Chin Med, 2020, 12(28): 6⁃10.

[84] Wu T, Shen M, Liu S, et al. Ameliorative effect of Cyclocarya paliurus polysaccharides against carbon tetrachloride induced oxidative stress in liver and kidney of mice [J]. Food Chem Toxicol, 2020, 135: 111014.

[85] Wu T, Shen M, Guo X, et al. Cyclocarya paliurus polysaccharide alleviates liver inflammation in mice via beneficial regulation of gut microbiota and TLR4/MAPK signaling pathways [J]. Int J Biol Macromol, 2020, 160: 164⁃174.

[86] 夏西超,李强,田刚,等.青钱柳多糖提取及青钱柳多糖固体饮料制备的方法: CN201910423436[P]. 2019⁃07⁃30.

[87] Xia X C, Li Q, Tian G, et al. A method to extract polysaccharide from Cyclocarya paliurus leaves and to prepare a new type of solid beverage containing Cyclocarya paliurus polysaccharide: CN201910423436 [P].2019⁃07⁃30.

[88] 谢建华,王之珺,林丽华. 一种具有抗氧化活性的青钱柳多糖泡腾片及其制备方法: CN107362146A[P]. 2017⁃11⁃21.

[89] Xie J H, Wang Z J, Lin L H. A method to prepare a new type of Cyclocarya paliurus polysaccharide effervescent tablets with antioxidation activity: CN107362146A[P]. 2017⁃11⁃21.

[90] 李婷婷,吴彩娥,方升佐,等. 青钱柳降血糖冲剂的制备方法: CN102525945A[P]. 2012⁃07⁃04.

[91] Li T T, Wu C E, Fang S Z, et al. Preparation of Cyclocarya paliurus polysaccharide granule with hypoglycemic activity: CN102525945A [P]. 2012⁃07⁃04.

[92] 陈运娇,林春秀,曹庸,等. 一种苦瓜青钱柳降脂保健茶的制备及应用: CN201810695020 [P]. 2018.

[93] Chen Y J, Lin C X, Cao Y, et al. Preparation and application of a compound Momordica charantia and Cyclocarya paliurus : CN201810695020 [P]. 2018.

[94] 张瑞雪,杨善彬,王晴晴, 等.青钱柳—绿茶降糖口服液的制备及质量标准研究[J].广州化工, 2019, 47(12): 60⁃63.

[95] Zhang R X, Yang S B, Wang Q Q, et al. Research on preparation and quality standard of Cyclocarya paliurus⁃green tea oral hypoglycemic agent [J]. Guangzhou Chem Ind, 2019, 47(12): 60⁃63.

[96] 陈颖, 汪雷, 汪荣斌, 等. 青钱柳叶口服液制备工艺研究[J]. 甘肃中医药大学学报, 2018, 35(4): 40⁃43.

[97] Chen Y, Wang L, Wang R B, et al. Research on preparation technology of Cyclocarya paliurus leaves oral liquid [J]. J Gansu Univ Chin Med, 2018, 35(4): 40⁃43.

基金资助

湖北省宜昌市自然科学基金项目(A18-302-a02)