国产巴西人参的生药学

Pharmacognostical study on domestic Pfaffia glomerata

摘要

为了进一步开发国内引种栽培的巴西人参药材，通过对巴西人参的原植物形态、药材性状、粉末显微鉴别及薄层层析等进行分析研究，发现该药材的原植物形态特征基本稳定、根横切面结构除三生维管束构造异常外其余特征稳定，粉末鉴别草酸钙砂晶特征明显，药材与对照药材及β⁃蜕皮甾酮对照品在相应位置均有相同颜色斑点显现。实验结果稳定，可作为巴西人参生药学鉴别的重要依据。

Abstract

In order to further develop the Pfaffia glomerata medicinal materials introduced and cultivated in China from Brazil， the original plant morphology， medicinal properties， powder microscopic identification and thin layer chromatography of Pfaffia glomerata were analyzed and studied. It was found that the original plant form of the medicinal material was basically stable， the root cross⁃sectional structure was stable except the abnormal vascular bundle structure of the three generations， and the powder had obvious characteristics of calcium oxalate sand crystals. The medicinal materials， the control medicinal materials and the β⁃ecdysterone reference material all had the same color spots in the corresponding positions.The experimental results are stable， and can be used as an important basis for identification of Pfaffia glomerata pharmacognosy.

Graphical abstract

关键词

国产巴西人参 / 原植物形态特征 / 性状鉴别 / 显微鉴别 / 薄层层析

Key words

domestic Pfaffiaglomerata Pedersen / original plant morphology / character identification / microscopic identification / thin⁃layer chromatography （TLC）

0 引 言

巴西人参为苋科（Amaranthaceae）无柱苋属（Pfaffia）的多年生草本植物的干燥根和根茎。原产南美洲^［1］，在当地民间用于治疗阳痿、失眠、肿瘤、溃疡、风湿等，已有300多年的历史，是当地民间常用的一种草药。在国外已被开发成多种健康相关产品^［2~5］。中国于二十世纪90年代末，成功引入广西、浙江、四川等地栽培。经研究证明，巴西人参对小鼠耐缺氧、抗疲劳及抗肿瘤能力具有明显的增强作用^［6］，对小鼠移植性H₂₂和S₁₈₀实体瘤有抑制作用^［7］；有文献报道采用TLC法和HPLC法对国产巴西人参药材中的齐墩果酸进行定性鉴别研究和含量定量研究，并初步建立了国产巴西人参药材的齐墩果酸薄层层析（thin⁃layer chromatography， TLC）和高效液相色谱（high performance liquid chromatography， HPLC）质量控制标准^［8，9］。但有关国产巴西人参生药学方面的研究、专属性更强的代表性成分的TLC研究还未见报道。本文对国内引种栽培的巴西人参的主要品种Pfaffia glomerata（Spreng.）Pedersen进行生药学方面的研究，为国产巴西人参的进一步开发利用提供鉴别依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品来源与试剂

国产巴西人参实验材料来自广西药用植物园种植基地、华夏本草集团广西隆安县种植基地和浙江庆元县黄沙洋蔬菜种植示范基地，经中国医学科学院药用植物研究所张本刚教授鉴定为苋科植物巴西人参〔Pfaffia glomerata（Spreng.）Pedersen〕的根及根茎，实验批次采集于巴西巴拉那州（2019.10.13）（编号：BXRS⁃1），广西药用植物园种植基地（2019.10.30）（编号：BXRS⁃2），华夏本草集团广西隆安县种植基地（2019.11.15）（编号：BXRS⁃3），浙江庆元县黄沙洋蔬菜种植示范基地（2019.11.23）（编号：BXRS⁃4）。巴西人参对照药材采自巴西巴拉那州，由巴西德清翰尔斯食用资源开发有限公司赠送；β⁃蜕皮甾酮对照品，购自中国食品药品检定研究院，批号为111638⁃201402；硅胶F₂₅₄薄层板，青岛海洋化工厂；甲醛⁃乙酸⁃乙醇（FAA）固定液、水合氯醛、稀甘油、乙酸乙酯、甲醇等均为市售分析纯。

1.1.2 主要仪器

101AS⁃2型数显电热恒温干燥箱，上海浦东荣丰科学仪器有限公司；Nikon Eclipse e200型光学显微镜，日本尼康公司；Canon K30301型扫描仪，佳能（中国）有限公司上海分公司；ZF⁃3型三用紫外分析仪，上海陈村分析仪器公司。

1.2 方法

1.2.1 原植物形态特征

通过观察本品原植物标本及实地考察原生状态的原植物，记录其特征。

1.2.2 性状鉴别和显微鉴别

取本品的根用眼观、鼻闻、手摸及放大镜等对国产巴西人参的外观进行观察，描述其药材性状并记录其特征。取本品的根用FAA固定液浸泡后徒手切片，先做成水装片进行观察，再用水合氯醛透化后置光学显微镜下观察拍照，并描述其显微构造特征；取本品做石蜡切片在光学显微镜下观察并扫描成像；另取本品粉末过五号筛，挑取少量粉末，置于载玻片上，分别用水和水合氯醛透化后在光学显微镜下观察并扫描成像。

1.2.3 薄层层析鉴别

取本品粗粉2 g，加入乙酸乙酯50 mL，加热回流1 h，滤过，滤液浓缩至近干，残渣加乙醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取巴西人参对照药材0.5 g，同法制成对照药材溶液。再取β⁃蜕皮甾酮对照品，加乙醇配制成每1 mL含0.5 mg的对照品溶液。吸取上述3种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶F₂₅₄薄层板上，以乙酸乙酯⁃甲醇（V_乙酸乙酯∶V_甲醇=10∶2）为展开剂展开，取出，晾干，置紫外灯光（254 nm）下检视。

2 结果与分析

2.1 原植物形态特征

本品为多年生草本。根茎粗短。根一条或数条，黄白色，粗壮肥厚。茎中空，直立，多分枝，节明显膨大，高达2 m；老茎表面紫棕色，有颗粒状或短刺状突起；嫩枝表面绿色，无毛或被柔毛。叶对生，叶柄长5~15 mm，被短毛；叶片长披针形，长3~10 cm，宽0.3~2.0 cm，先端渐尖，基部楔形，全缘，上表面无毛或稍具柔毛，下表面叶脉突起，具短柔毛。花期5~10月；二歧聚伞花序生于枝顶或叶腋，单枝或有二到三个分枝，花序梗长2~20 cm，具短柔毛；花小，白色，在花序轴上密集成直径约5 mm的头状或短穗状；花两性，中苞片卵形，膜质，基部具毛；侧苞片卵形，内凹，膜质，无毛或背面微具毛；萼片长圆形或披针形，三脉，无毛；雄蕊管短于萼片，子房卵球形，柱头头状，两裂，具乳突（见原植物照片）。花期4~7月。观察发现其根数量、大小随栽培年限不同而异，一般栽培时间越长根的数量越多、越粗壮；其嫩枝、叶柄、叶片上的柔毛常随栽培地域不同而异，一般越往北毛越多，越往南毛越少甚或光滑无毛。其余形态特征稳定，见图1。

2.2 药材性状

本品根茎呈不规则结节状，顶端常残留茎基，其下着生数条形状大小相近的根。根长圆柱形或长圆锥形，常扭曲，长12~20 cm，直径0.5~2.5 cm。表面灰黄色或淡棕色，具明显纵皱纹及横向皮孔样突起。质较硬，易折断，断面黄白色，较平坦略呈角质样，可见多数浅黄色小点（维管束）排列成2~7层同心环，见图2。气微，味微甘。

2.3 组织结构

本品横切面：木栓细胞数列，偶见单个或2~3个成群的类方形石细胞。栓内层较窄，数列细胞。中柱构造异常，三生维管束外韧型，断续排成2~7轮；最外轮维管束较小，木质部由1个或数个导管及木纤维等组成，导管微木化，可见形成层环；向内维管束较大，导管明显（图3A）。中央维管束2~3束。薄壁组织中有类圆形粘液细胞散在，粘液细胞及薄壁细胞中常含有草酸钙砂晶，见图3B。

2.4 粉末特征

粉末黄白色，草酸钙砂晶常见，散在或充塞于薄壁细胞或粘液细胞中。导管碎片常见，直径40~123 μm，多为网纹或具缘纹孔。可见木纤维，木纤维呈长条形或不规则长梭形，胞腔大，壁微木化，具单纹孔。偶见类方形石细胞。淀粉粒少，多为单粒，圆形或类圆形，直径11~28 μm，脐点、层纹不明显，复粒为2~3个分粒组成，见图4。

2.5 薄层层析鉴别

从3批国产巴西人参药材的薄层层析结果看出：本方法分离效果理想，在与对照品色谱和对照药材色谱相应位置上，分别有相同颜色的荧光斑点显现，但对照药材由于储存时间过长，有些成分的含量已经降低以至有些斑点无显现，见图5。

3 结论与讨论

对国产巴西人参的原植物形态特征观察研究结果表明，除嫩枝、叶柄、叶片上的柔毛随栽培地域不同而略有变异外，其余形态特征稳定。对国产巴西人参的显微研究结果表明，其组织构造异常，三生维管束的轮数常随生长年限不同而异，一般2~7轮，甚至更多，其余特征稳定。对国产巴西人参的薄层层析研究结果表明，在与对照品色谱和对照药材色谱相应位置上，本品分别都有相同颜色的荧光斑点显现。以上特征可作为巴西人参根的生药学鉴别依据。

巴西人参在民间用于多种疾病的治疗已有悠久的应用历史，从国内引种栽培以来逐渐受到人们的关注，由于其独特的功效，近些年国内也掀起了研究和利用巴西人参的热潮^{［10，11］}。本研究采用观察原植物形态、药材性状、显微鉴别及薄层层析的鉴别方法，对国产巴西人参的原植物形态、药材性状、横切面结构、粉末和薄层层析鉴别特性等进行观察和描述，初步制定了国产巴西人参（Pfaffia glomerata）的生药学研究鉴定方法，为制定药材质量标准、研究和利用该药材资源，为进一步开发该品种提供生药学鉴别依据。

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基金资助

广西科技计划项目(AD17292003)

广西科技计划项目(AD16380013)