沉默N-cadherin对人牙髓干细胞增殖和迁移能力的影响

摘要

目的探讨沉默N-cadherin对人牙髓干细胞（dental pulp stem cells,DPSCs）增殖和迁移能力的影响，为基于DPSCs的牙髓再生提供实验依据。方法采用N-cadherin sh RNA慢病毒转染DPSCs,q RT-PCR、Western blot检测N-cadherin的表达水平，验证沉默效率。实验分为阴性对照组（sh RNA-NC）和N-cadherin sh RNA沉默组。采用CCK-8法检测细胞增殖能力，流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况，Transwell法检测细胞迁移能力。结果N-cadherin sh RNA可显著降低DPSCs的N-cadherin m RNA和蛋白的表达水平（P<0.001）。N-cadherin sh RNA组细胞增殖活性分别在细胞接种的第3、4天高于sh RNA-NC组，第6～8天低于sh RNA-NC组，差异均具有统计学意义（P<0.05）；在第3天时，N-cadherin sh RNA组处于S期和G2期的细胞比例大于sh RNA-NC组（P<0.05）；在第6天时，N-cadherin sh RNA组细胞处于S期和G2期的比例小于sh RNA-NC组（P<0.05），同时N-cadherin sh RNA组凋亡细胞比例大于sh RNA-NC组（P<0.01）；分别以低细胞密度和高细胞密度接种于Transwell上室培养20 h,N-cadherin sh RNA组穿过Transwell上室小孔的细胞数量均多于sh RNA-NC组（P<0.001）。结论沉默N-cadherin表达可促进DPSCs早期的增殖和迁移能力。

关键词

牙髓干细胞 / 增殖 / 迁移 / N-cadherin / 牙髓再生 / 细胞周期 / 细胞凋亡 / 慢病毒 / 微环境